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奶牛酮病是奶牛产后高发的一种由能量负平衡（Negative energy balance,NEB）引起的代谢性疾病,研究表明奶牛NEB期间内分泌激素可能在动员机体储备方面发挥重要作用。生长激素（Growth hormone,GH）是一种多功能性激素,目前对GH的研究主要围绕脂肪分解、抑制脂肪合成和氧化供能进行,但奶牛发生自然酮病过程中GH的动态监测未见报道。酮病期间过度体脂动员使血液非酯化脂肪酸（Non-esterifiedlipided fatty acid,NEFA）浓度增加,活性氧（Reactive oxygen species,ROS）生成增加,最终引起氧化应激。本研究旨在观测自然发病的酮病奶牛血浆GH的动态变化,分析酮病奶牛发病期间氧化应激情况和各指标间的相关性,以及β-羟基丁酸（β--hydroxybutyric acid,BHBA）对体外肝细胞氧化关键酶及GH相关基因mRNA表达的影响。实验一:体内实验——酮病奶牛产后GH等指标的动态变化。5周内变化:选取临产荷斯坦奶牛62头,在分娩当天至产后5周内,每周采血1次（共采血6次）并检测血浆BHBA水平,对检出的酮病奶牛(BHBA≥1.2mmol·L-1)设为实验组（SK）,选胎次、体况相近奶牛(BHBA<1.0mmol·L-1)与实验组两两配对设为对照组（NK）,最后选取SK组12头、NK组12头。每周采血同时评估奶牛体况评分（body condition score,BCS）并记录日产奶量（milk yield,MY）。动态监测血浆GH、BHBA、NEFA、血糖（Glucose,GLU）的变化并绘制各指标动态变化曲线;同时检测样本的氧化应激指标[过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathioneperoxidase,GSH-Px）、丙二酸（malondialdehyde,MDA）]水平,分析GH与检测指标间的相关性。结果表明,产后6周内SK组GH、BHBA、NEFA的血浆水平极显著高于NK组的水平（p<0.01）,血浆GLU水平极显著低于NK组的水平（p<0.01）;相关性分析结果表明SK组奶牛的血浆GH水平与BHBA、NEFA水平分别呈显著正相关（r=0.495,p=0.000;与r=0.494,p=0.000）,与GLU显著负相关（p=0.000,r=-0.535）;GH在产后1、2周最高,与BHBA、NEFA变化趋势相同,GLU在产后第2周最低。SK组MDA水平极显著高于NK组（p<0.01）,MY、CAT、GSH-Px极显著低于NK组,且SK奶牛BCS丢失更多,相关性分析显示SK组GH与MDA呈正相关（r=0.443,p=0.000）,与 CAT、GSH-Px呈负相关（r=-0.597,p=0.000;r=-0.610,p-0.000）。1日内变化:检出奶牛BHBA≥1.2mmol·L-1次日即对其进行日内 12h的动态监测,采血时间为10:00～22:00,每隔3h采血一次,共采血5次。选择试验奶牛8头,另配对设置对照奶牛8头,所得血样同样检测血浆GH、BHBA、NEFA、GLU 水平。结果发现,SK 组血浆 GH、BHBA、NEFA水平显著高于NK组的水平,且SK组GH分别与BHBA、NEFA 呈显著正相关（r=0.550,p=0.000;r=0.663,p=0.000）,SK 组 GLU 显著低于 NK 组且呈负相关（r=-0.419,p=0.004）。另发现饲喂时间会影响各指标的血浆水平,即饲喂1h后GH水平下降、BHBA、NEFA、GLU上升;饲喂4h后GH、BHBA、NEFA血浆浓度最高而GLU最低。实验二:BHBA对体外肝细胞氧化关键酶及GH相关基因mRNA表达的影响:通过添加不同浓度BHBA(0、0.6、1.2、3.0 mmol·L-1)检测抗氧化指标变化。结果发现随着BHBA浓度和培养时间（Oh、6h、12h、24h、48h）增加,超氧化物歧化酶（Superoxidedismutase,SOD）、CAT、GSH-Px酶活性降低,MDA浓度逐渐增多,qPCR检测结果发现GH相关基因生长激素受体（growthhormonereceptor,GHR）、胰岛素样生长因子 1（insulin-likegrowthfactor1,IGF1）、胰岛素样生长因子 1 受体（IGF-1 receptor,IGF-1R）、抗氧化酶相关基因（CAT、GSH-Px、SOD）mRNA表达均降低。结论:本研究首次证明产后荷斯坦奶牛自然发生酮病期间的血浆GH7水平极显著高于健康奶牛的水平,且GH在产后1-2周达到最高水平;酮病检出次日,GH水平极显著高于健康奶牛的水平,日内动态发现其与采食时间也具有一定关系。高GH水平与高NEFA水平显著相关。酮病奶牛的氧化应激较健康奶牛的严重,体外实验发现肝细胞GHRmRNA水平降低可降低IGF-1、IGF-1RmRNA水平,且高浓度BHBA抑制抗氧化基因CAT、GSH-Px、SOD mRNA表达。综上所述,可以验证GH是酮病发生的内分泌基础之一。