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本研究应用1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)在体外构建未分化的和全反式维甲酸(ATRA)与十四烷酰佛波醇乙酸酯(TPA)序贯分化的SH-SY5Y细胞损伤的帕金森病(PD)模型,并进一步研究这两种PD细胞模型的蛋白质组学改变,筛选出与MPP+作用相关的蛋白质,为阐明PD的发病机制提供新的线索和理论依据。对构建的PD细胞模型通过MTT比色法检测细胞活性及代谢状态、Hoechst33342染色检测细胞凋亡和台盼兰染色检测细胞的死亡率。采用二维差异凝胶电泳(2D-DIGE)和基质-辅助激光解析／电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术分析MPP+诱导的两种SH-SY5Y细胞PD模型的蛋白质组学改变。在MPP+处理24小时的未分化SH-SY5Y细胞中鉴定出3个差异表达蛋白：可溶性抗药性相关钙结合蛋白(sorcin)、膜联蛋白V (annexin V)和核糖体蛋白PO (RPLPO),它们在功能上分别与钙离子稳态、DNA损伤修复和凋亡有关。在MPP+处理48小时的ATRA和TPA序贯分化的SH-SY5Y细胞中确切地鉴定了10个差异蛋白点,代表了8个不同的蛋白质：核磷蛋白(NPM1)、含TCP1的伴侣蛋白β亚基(CCTβ)、90kDa热休克蛋白β(HSP90AB1)、14-3-3蛋白p亚型(14-3-3p,基因名Ywhab)、14-3-3蛋白ε亚型(14-3-3ε,基因名Ywhae)、14-3-3蛋白ζ亚型(14-3-3ζ,基因名Ywhaz).α-微管蛋白(a-tubulin)和3-磷酸甘油酸脱氢酶(Phgdh),他们分别参与细胞骨架的重构、分子伴侣活性、L-丝氨酸的生物合成等。这些结果表明很多途径与MPP+在SH-SY5Y细胞诱导的毒性有关,本研究结果为进一步研究PD的发病机制和合理筛选治疗靶点提供了有价值的新的线索和理论依据。在所鉴定的蛋白中,RPLPO在PD细胞模型中首次报道,NPM1、CCTβ、HSP90AB1、14-3-3β、14-3-3ε、14-3-3ζ、Phgdh和sorcin在MPP~-诱导的SH-SY5Y细胞PD模型中首次报道,膜联蛋白V表达水平上调在MPP~+诱导的SH-SY5Y细胞PD模型首次报道。