苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是目前产量多、使用广泛的微生物农药之一,具有较好的经济价值,其产生的伴孢晶体毒素可以直接作用于害虫,还可以将其毒素基因作为转基因农作物的靶标基因,因此该微生物资源有非常大的应用价值。在BT毒素杀虫过程中,发挥杀虫作用的关键步骤是毒素与受体的识别与结合,因此BT毒素受体的研究对探索BT毒素的杀虫机理具有重要的意义。目前,在昆虫中肠中发现的受体主要有四类:碱性磷酸酶(ALP),氨肽酶N(APN),钙粘蛋白(Cadherin)和糖脂类。近年来,一些鳞翅目昆虫ABC家族的多种蛋白被报道可以作为BT毒素的受体并且可能与BT毒素的抗性相关,目前有关斜纹夜蛾、棉铃虫、红铃虫和粘虫ABCC蛋白的报道尚少,在离体细胞水平尚未证实能否介导细胞对Bt毒素的毒力。本实验中,首先在细胞水平用RNAi技术沉默了SlABCC3基因的表达,发现SIABCC3基因被沉默后,TH细胞对Cry1Ac毒素的敏感性显著下降(p<0.05);然后再将实验室已经构建好的pIE2-EGFP-N1-SIABCC3-GFP真核表达质粒分别导入到TH细胞和TnH5细胞中,超表达后,发现这两种不同的昆虫细胞对Cry1Ac毒素的敏感性都显著增强(p<0.05);研究还发现,在TnH5细胞中,S1ABCC3蛋白介导的Cry1Ac毒素的毒力比棉铃虫HaCadherin蛋白更强;真核表达质粒pIE2-EGFP-N1-S1ABCC3-GFP 和 pIE2-EGFP-N1-HaCadherin-mCherry,在 TnH5 细胞中共表达,细胞对Cry1Ac毒素的敏感性显著增强(p<0.05),两者具有协同作用。因此,斜纹夜蛾细胞系SlABCC3蛋白可以作为BT毒素的受体,并且与棉铃虫HaCadherin受体蛋白一起作用时对毒素具有显著协同作用。此外,本研究还证明棉铃虫ABCC2、红铃虫ABCC2以及粘虫的ABCC2和ABCC3蛋白都定位在细胞质中和细胞膜上;并且这几种蛋白均能介导Cry1Ac毒素对昆虫细胞的毒力,提示在多种鳞翅目昆虫中,ABCC2和ABCC3蛋白都可以作为BT毒素的受体,即鳞翅目昆虫的ABCC2和ABCC3蛋白作为BT毒素的潜在受体具有普遍性。