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药用植物黄芪在中医临床中应用广泛,其根茎是主要入药部分,以主药或配药的方式出现在方剂中。现代医学研究表明黄芪具有多种成分,包括多糖、皂甙、黄酮等,这些成分具有各自的生物活性。多糖的研究成为了近些年研究者的热点。多糖可以抗高血糖、抗炎、抗氧化、抗病毒,抗辐射等。然而不同来源、提取方式的异同及多糖理化性质的不同,其生物活性也会有所差异。本研究采用地衣芽孢杆菌发酵黄芪粉提取多糖,其中在36 h多糖含量最高达到5.417 g/100 g。通过液相色谱对发酵黄芪多糖与水提黄芪多糖中单糖的组成进行了鉴定。结果表明,两种方式提取的单糖均由有鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖醛酸、木糖、岩藻糖。两者之间含量存在差异。发酵提取多糖中甘露糖含量约是水提法含量的1.96倍,约为鼠李糖的2.26倍,葡萄糖醛酸的1倍、葡萄糖的1.83倍,约为半乳糖醛酸的2倍,约为阿拉伯糖的1.8倍。分子量及分子量的分布影响着多糖的活性。采用激光散射-凝胶色谱联用的方法对水提多糖提取物和发酵多糖提取物进行了测定。试验结果表明,两种不同方法提取多糖的分子量及区间不同。分子量的分布随着重均分子量的增大而变大,分子量分布越宽。两种多糖中Mw/Mn值均大于1,说明无论水提多糖提取物还是发酵黄芪多糖提取物均是由分子量较大且分布较广的多糖组成。通过对比发现发酵黄芪多糖提取物中的Peak 2的分子量分布最窄,表明该发酵多糖提取物比水提黄芪多糖稳定。为探讨发酵黄芪多糖提取物对Vero的细胞毒性,将提取的发酵黄芪多糖配成不同浓度添加到细胞中培养,并设置对照组。试验结果表明发酵黄芪多糖提取物对Vero细胞无细胞毒性（P>0.05）。将不同浓度发酵黄芪多糖提取物添加到Vero细胞中,通过TCID50计算多糖对PEDV滴度的影响,试验结果表明,在多糖浓度为100μg/mL和400μg/mL之间,病毒的TCID50随着剂量的增加开始下降。当多糖浓度为400μg/mL,病毒滴度最低,且存在显著性差异（P<0.05）。在不同时间段将不同浓度发酵黄芪多糖产物添加到细胞中,在24 h到48 h病毒增殖前期多糖对可抑制病毒的复制,且多糖产物浓度在400μg/mL 24 h时效果最好。为探讨不同方式注射发酵黄芪多糖提取物对猪流行性腹泻（PEDV）疫苗免疫猪免疫反应的影响。12头9日龄仔猪随机分为4组,对照组注射生理盐水。另外三组试验组中第一组只注射疫苗,第二组注射疫苗并通过肌肉注射多糖,第三组注射疫苗和后海穴注射多糖提取物,将多糖按照400 mg/kg含量注射给猪免疫。在0 d、7 d、14 d、21 d、28 d采集前腔静脉血来测定IL-6、IFN-γ及sIgA的水平。IL-6含量测定试验结果表明,在注射多糖的7-28 d,IL-6含量呈动态变化,在注射多糖提取物后的第14 d达到高峰。在注射多糖第14 d、21 d,后海穴注射多糖提取物组与疫苗组存在显著性差异（P<0.05）;在第14 d,肌肉注射多糖提取物组与疫苗组没有显著性差异（P>0.05）;在第21 d,肌肉注射多糖与后海穴注射多糖没有显著性差异（P>0.05）。与单独注射疫苗组相比注射多糖提取物可提高IL-6含量。测定了的IFN-γ含量,在免疫后的第7 d、28 d时,组间含量没有显著性差异（P>0.05）。在第14 d和21 d,肌肉注射多糖提取物组与后海穴注射多糖提取物组没有显著性差异（P>0.05）,在免疫后的第14 d,后海穴注射多糖产物组与疫苗组存在显著性差异（P<0.05）。肌肉注射多糖产物组与后海穴注射肌肉组在7-21 d阶段中,sIgA的含量成上升趋势。在第14 d时,疫苗组与注射多糖提取物中sIgA含量存在显著性差异（P<0.05）,在第21 d时,后海穴注射多糖提取物达到最高,与疫苗组存在显著性差异（P<0.05）。本研究通过产酶地衣芽孢杆菌发酵提取黄芪多糖,该方法比水提法获得了更高的多糖及单糖产量,发酵黄芪多糖产物对PEDV疫苗诱导的免疫应答反应显示了明显的增强作用。本研究为黄芪等天然多糖植物在畜牧业中的推广应用奠定了良好的理论基础。