miR-629-5p对胃癌细胞生物学行为的影响及其靶基因MTRF1L的鉴定

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目的:1.检测 miR-629-5p在胃癌组织和细胞中的表达情况;2.研究 miR-629-5p对胃癌细胞 MKN-45生物学行为的影响;3.预测miR-629-5p的靶基因并鉴定其中一个靶基因。  方法:1.通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qPCR)检测 miR-629-5p在16例胃癌组织和3种胃癌细胞中的表达水平;2.转染miR-629-5p抑制剂下调胃癌细胞MKN-45中miR-629-5p的表达;3.CCK-8实验和平板克隆实验检测MKN-45增殖;4.Transwell小室实验和划痕实验检测MKN-45迁移和侵袭;5.细胞流式技术检测MKN-45凋亡;6.通过miRWalk2.0工具预测miR-629-5p的靶基因;7.Western blot检测 MKN-45中线粒体样转录释放因子1(mitochondrial translational release factor1 like, MTRF1L)蛋白表达。  结果:1.与癌旁组织[1.574(0.197,4.503)]相比,胃癌组织中miR-629-5p相对表达量[2.081(0.231,7.216)]明显增加(P=0.003);与正常胃黏膜细胞(1.017±0.226)相比,胃癌细胞中miR-629-5p相对表达量(MKN-28:3.040±0.506;MKN-45:5.924±0.403;SCG-7901:3.377±0.372)均明显增加(P=0.000);2.下调miR-629-5p表达后,胃癌细胞MKN-45的增殖减慢(IN:64±12;NC:102±12;P=0.018),迁移(IN:106±9;NC:194±29;P=0.008)和侵袭(IN:25±7;NC:60±9;P=0.007)能力减弱,凋亡细胞数增加[IN:(19.257±2.440)%;NC:11.687±2.237;P=0.017];3.miR-629-5p预测的靶基因共有46个,下调miR-629-5p的表达后,MTRF1L表达量明显增加(IN:0.923±0.101;NC:0.556±0.026;P=0.004)。  结论:1.miR-629-5p在胃癌组织和细胞中表达均上调;2. miR-629-5p可促进MKN-45的增殖,增强MKN-45迁移和侵袭能力,抑制MKN-45凋亡;3.MTRF1L可能是miR-629-5p的靶基因之一。
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