鸡呼肠孤病毒和金黄色葡萄球菌对SPF鸡的协同致病作用研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ciedan
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禽关节炎是一种养禽业中比较常见的疾病,该病病因较为复杂,其中细菌性关节炎常由金黄色葡萄球菌(Staphylococcus Aureus,SA)感染引起,病毒性关节炎的病原为禽呼肠孤病毒(Avian Reovirus,ARV)。除单独感染外,在临床上经常发生二者的混合感染,主要表现为精神沉郁、采食困难,禽跗关节/趾关节肿胀、瘫痪、站立困难等病症,患病禽只生长迟缓、生产性能下降,严重影响着养殖业的生产效益。针对该现象我们开展了如下研究:为确定禽关节炎发生的原因,2020.10~2021.10期间我们采集了共计77份山东省不同地区养殖场的鸡跗关节肿胀病料,对上述病料进行RT-PCR检测以确定有无ARV的感染;使用甘露醇氯化钠琼脂培养基分离细菌,以确定有无SA的感染。结果显示,在77份鸡跗关节肿胀病料中,单独感染ARV的占比为22%,单独感染SA的占比为19%,ARV与SA共感染的占比为46%,显然二者共感染是造成鸡关节炎的主要病因。在此基础上我们进行了鸡呼肠孤病毒、金黄色葡萄球菌单独感染与共感染对SPF鸡的致病性研究。本研究将240只1日龄SPF鸡随机分为8组:A组,单独感染ARV;B组,单独感染SA;C组,同时感染ARV与SA;D组,先感染ARV,12 h后感染SA;E组,先感染SA,12 h后感染ARV;F组,先感染ARV,24 h后感染SA;G组,先感染SA,24 h后感染ARV;H组,对照组。ARV通过脚垫进行接种,SA涂抹关节进行接种,连续观察30 d,同时记录试验鸡的体重、跗关节直径、临床症状、病理变化以及死亡率,并在1 dpi、3 dpi、5 dpi、7 dpi、10 dpi、14 dpi、18 dpi、22 dpi、26 dpi及30dpi时,每组随机取3只,分别收集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、十二指肠、胸腺、腺胃、大脑、法氏囊、胰腺和肌腱进行SA的检测;收集心脏、肝脏、脾脏、肾脏、十二指肠、肌腱以及跗关节皮肤进行病理组织学检查;收集主要免疫器官和肌腱进行ARV病毒载量的检测,同时利用泄殖腔棉拭子检测了试验鸡的排毒情况,并且采血进行主要细胞因子水平、ARV抗体水平和病毒载量的测定。结果显示,单独感染组与共感染组的体重均显著低于对照组(p<0.01),其中共感染组(E组)的体重最小、生长速度最慢;同时显示共感染组的死亡率、跗关节肿胀程度显著高于对照组(p<0.01),其中共感染组(E组)相较于其他感染组死亡率显著升高,死亡率为23.33%,死亡时间集中在5 dpi~14 dpi,跗关节直径较其它感染组显著增粗;相比单独感染呼肠孤病毒组或者金黄色葡萄球菌组,呼肠孤病毒与金黄色葡萄球菌共感染组能够促进鸡关节炎相关病症的发展,造成试验鸡多脏器的组织学损伤,但不同共感染组的临床症状及病理变化无显著差异;对试验鸡各个脏器进行细菌分离,结果显示,在共感染组中感染SA的脏器数量显著高于单独感染组,其中共感染组主要从关节中分离到SA,单独感染SA组则主要从腺胃中分离到SA,不同共感染组之间差异不大,单独感染ARV组和对照组的脏器均未分离到SA。病毒载量检测结果表明,在关节中,共感染组的ARV病毒载量显著高于单独感染ARV组,复制高峰发生在5 dpi,其它脏器与之相似;在共感染组中,血液样品中的主要细胞因子水平呈现先升后降的趋势,表明ARV和SA共感染能够导致试验鸡发生一定的免疫抑制。综上,ARV和SA依据其不同的感染时序对SPF鸡存在协同致病作用,并初步揭示了ARV与SA在SPF鸡体内的感染及分布规律。上述研究为临床禽关节炎的防控提供了一定的试验依据。
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