马铃薯卷叶病毒(PLRV)张家口分离物外壳蛋白基因的克隆及表达

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马铃薯卷叶病毒(PLRV)为黄症病毒属成员,是引起马铃薯严重减产的世界性的重要病毒病害.该研究直接从感染PLRV的马铃薯植株中提取RNA并进行了PLRV外壳蛋白(CP)基因克隆,参照国外报导的PLRV CP基因序列,设计合成了一对引物,从感染PLRV的张家口马铃植株韧皮部中提取出PLRV RNA,并以此为模板,采用RT-PCR方法,扩增出约630bp的cDNA片段.将PCR产物克隆到pGEM-3Zf(+)中间载体上,转化大肠杆菌E.coli DH5a菌株,挑取克隆,经EcoRI、SalI双限制性内切酶酶切检测分析证明,已经得到了定向插入的重组质粒.
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