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目的:食管癌(Esophageal cancer，EC)是一种常见的消化道恶性肿瘤，因病死率高、治疗效果差而位于肺癌、胃癌、肝癌之后的第四位恶性肿瘤。其发病因素复杂，包括:吸烟、饮酒、感染、吃过热食物、食管反流病、遗传因素等，寻找一种确切的食管癌生物学标记物和分子治疗靶点具有重大意义。 细胞信号传导是细胞将外界刺激通过胞膜及胞内受体传导到细胞内部从而引起细胞相应反应的过程，与细胞的各种生理及病理现象有密切关系。细胞增殖是细胞的一种不断更新与变化的过程，肿瘤在发生、发展时期细胞增殖旺盛，是肿瘤的一个显著特点。体内多种信号通路能引起细胞正常与异常增殖情况。因此对于细胞信号传导通路中关键位点的研究成为目前在肿瘤机制及治疗方面的热点。 CRKL(Chicken Tumor virus10 regulator of kinase like protein)又称CT10激酶调节子样蛋白，是一种由CRKL基因编码的信号接头蛋白，本身不具有酶的活性，但能通过其结合域与不同信号传导途径中的上、下游蛋白相结合，从而起到调控细胞信号输出的作用，对细胞及机体内的生理及病理过程中起着重要影响，其功能包括调节细胞增殖、粘附、运动、吞噬、分化、转化和凋亡等。国内外大量研究表明，CRKL在多种恶性肿瘤中呈现基因扩增与蛋白高表达现象，并引起肿瘤细胞增殖，结合临床病理参数进行分析发现其与肿瘤的分化、分期、浸润程度、转移及预后有关，因此可认为CRKL参与了多种恶性肿瘤的发生及发展过程。Ki67蛋白是一种与细胞有丝分裂相关的蛋白质，与细胞增殖密切相关，是反映肿瘤细胞增殖活性的公认标记物，在多种肿瘤中呈现高表达，对肿瘤的发生、发展、分期、浸润、转移、复发和预后等具有重要影响。 本研究我们通过检测CRKL基因和蛋白在食管癌组织及癌旁正常组织中的表达情况，并结合临床病理参数进行分析，探讨CRKL与食管癌发病及病情进展之间的关系;同时检测Ki67蛋白在相应食管癌组织及癌旁正常组织中的表达情况，并结合临床病理参数进行分析，探讨Ki67与食管癌发病及病情进展之间的关系;我们还分析CRKL蛋白与Ki67蛋白在食管癌组织中表达的关系，进一步探寻CRKL联合Ki67在食管癌中表达的意义。 方法:采用SYBR Green实时荧光定量聚合酶链式反应(real timefluorescent quantitative polymerase chain reaction)方法分别检测20例食管癌和20例癌旁5cm以上正常食管组织中CRKLmRNA的表达情况，应用免疫组化链霉素抗生物素抗生物素-过氧化物酶(streptavidin peroxidase，SP)法分别检测60例食管癌组织和56例癌旁5cm以上正常食管组织中CRKL及Ki67蛋白表达情况。 结果: 1 CRKLmRNA在食管癌组织及癌旁正常组织中表达情况 食管癌组织中CRKLmRNA的表达量是(11.275±1.050)，癌旁正常组织中的CRKLmRNA的表达量是(0.975±0.278)，食管癌组织中的CRKLmRNA的表达明显高于癌旁正常组织中的CRKLmRNA的表达，差异具有统计学意义(P＜0.01)。 2 CRKL和Ki67蛋白在食管癌组织及癌旁正常组织中表达情况和与临床病理参数的关系 CRKL蛋白在食管癌中阳性表达率为56.7％(34/60)，明显高于正常食管癌旁组织中阳性表达率5.4％(3/56)(P＜0.01);其表达与食管癌分化程度(P=0.001)、TMN分期(P=0.029)、浸润深度(P=0.049)及淋巴结转移(P=0.012)有关，与患者年龄、性别、肿瘤大小、部位无关(P＞0.05)。Ki67蛋白在食管癌中阳性表达率为68.3％(41/60)，明显高于正常食管癌旁组织9.1％(5/56)(P＜0.01);其表达与肿瘤的TMN分期(P=0.006)、淋巴结转移(P=0.028)有关，但与患者年龄、性别、肿瘤大小、部位、分化程度、浸润深度无关(P＞0.05）。 3食管癌组织中CRKL和Ki67蛋白表达强度与病理参数的关系 CRKL蛋白的表达强度与食管癌分化程度、TMN分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P＜0.05)。Ki67蛋白表达强度与食管癌的TMN分期、淋巴结转移有关(P＜0.05)。 4 CRKL和Ki67蛋白在食管癌组织中的表达关系 在26例CRKL阴性表达的食管癌组织中，Ki67阴性12例，阳性+7例，阳性++5例，阳性+++2例;在7例CRKL阳性+表达的食管癌组织中，Ki67阴性3例，阳性+2例，阳性++1例，阳性+++1例;在18例CRKL阳性++表达的食管癌组织中，Ki67阴性2例，阳性+1例，阳性++9例，阳性+++6例;在9例CRKL阳性+表达的食管癌组织中，Ki67阴性2例，阳性+3例，阳性++2例，阳性+++2例。CRKL蛋白与Ki67蛋白在食管癌组织中的表达呈正相关(r=0.352，P=0.006)。 结论: 1 CRKL基因及蛋白和Ki67蛋白在食管癌组织中均呈高表达，提示CRKL和Ki67与食管癌的发病有关。 2 CRKL表达阳性率及强度与食管癌分化程度、TMN分期、浸润深度及淋巴结转移有关;Ki67蛋白表达阳性率及强度与食管癌TMN分期和淋巴结转移有关，提示CRKL与Ki67与肿瘤的扩散和侵袭力有关，参与病情的进展，对判断食管癌的预后有一定帮助。 3食管癌组织中CRKL蛋白和Ki67蛋白的表达强度呈正相关，提示CRKL与Ki67能提示食管癌细胞的增殖情况，联合检测CRKL与Ki67的表达情况能提示食管癌的恶性程度。