黄皮果果核挥发油抗UV致小鼠皮肤光老化损伤的实验研究

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【目的】  1. 构建小鼠光老化模型并对黄皮果果核挥发油抗小鼠皮肤光老化模型的药效进行宏观和皮肤水分含量评价。  2. 通过HE染色、VG 染色、Gomori染色和Masson-Fontana黑素染色,观察黄皮果果核挥发油对小鼠光老化皮肤组织结构的影响。  3. 探讨NF-κB P65蛋白的表达在黄皮果果核挥发油防御UV致小鼠光老化模型中的作用。  【方法】  42只 8周龄雌性 KM小鼠随机分为7组,分组如下:去毛不照射组(Sham-operation control group, SC组)、模型组(Model control group,MC组)、溶剂组(Vehicle-treated control group, VC组)、阳性组(Active control group, AC组)、黄皮果挥发油低剂量组(Wampee oil low dose group, WO-L组)、黄皮果挥发油中剂量组(Wampee oil medium dose group, WO-M组)、黄皮果挥发油高剂量组(Wampee oil high dose group, WO-H组),每组6只。分别在紫外照射前进行剃毛处理。各组小鼠照射前30min,按100μl/只在背部裸露皮肤上涂抹相应的药物,每天一次,共计8个周期。用长波紫外线(Ultraviolet A,UVA)、中波紫外线(Ultraviolet B,UVB)灯进行照射并用紫外辐射测定计测定紫外强度,辐射单位为MED(minimal erythemal dose;70 mJ/cm2),以1MED为起始照射剂量,连续照射3天,间隔一天进行下一周期的紫外照射,进行下一个周期紫外照射时递增1个MED,照射时间为八个周期,照射期间密切观察小鼠皮肤状况,参照Bissett等人的评价标准进行皮肤进行评价计算宏观视觉评分,烘干皮肤进行水分含量测量。取小鼠背部皮肤进行HE染色、Gomori醛品红染色、VG 染色和Masson-Fontana黑素染色,观察黄皮果对光老化皮肤组织结构的改变,用免疫组化和蛋白印迹检测NF-κB P65蛋白量的表达,比较各组蛋白量的表达和趋势。  【结果】  1. 黄皮果果核挥发油50μl/ml和100μl/ml可改善UV照射引起的皮肤粗糙和皮肤损伤等情况,在100μl/ml还能起到抵御紫外造成的皮肤屏障功能减弱的作用。  2. 对皮肤进行HE染色、Gomori染色、VG染色及黑素染色,发现本实验所构建小鼠皮肤光老化模型符合临床病理特征,2%的维生素E作为阳性对照药,能起到显著的抗皮肤光老化作用。黄皮果果核挥发油剂量在25μl/ml时对皮肤光老化没有显著影响,剂量在50μl/ml时可抑制UV所致皮肤角质层增厚,而当剂量达到100μl/ml时能起到与2%维生素E类似的抗紫外所致皮肤表皮病变的作用。  3. 黄皮果果核挥发油在25μl/ml时,可抑制UV所致皮下组织炎症反应,黄皮果果核挥发油在50μl/ml时可抑制UV所致真皮和皮下组织炎症反应,黄皮果果核挥发油在100μl/ml时可抑制UV所致各层皮肤炎症反应。  【结论】  1. 黄皮果果核挥发油可改善UV照射引起的皮肤粗糙和皮肤损伤等表观现象,以及抵御紫外造成的皮肤屏障功能减弱的作用。  2. 黄皮果果核挥发油可抑制UV所致皮肤炎症反应的作用。
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