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硒是生物体维持内环境稳态所必需的微量元素。目前环境中硒缺乏问题在全球范围内日益引起人们的重视,硒缺乏会引起多种疾病,如白肌病、肝坏死、癌症、糖尿病以及心肌坏死等。缺硒诱导的心脏疾病主要通过氧化应激与炎症造成的心肌细胞损伤最终导致细胞凋亡等形式的细胞死亡。心肌细胞死亡是形成心脏综合疾病的主要原因,坏死是硒缺乏症中心肌细胞死亡的主要形式。程序性坏死是一种非凋亡性的程序性死亡,这种细胞死亡模式在硒缺乏和心脏疾病中起重要作用。microRNA作为一段非编码RNA,可以通过靶向性介导目的基因转录后沉默,调控蛋白表达进而操控体内不同生物反应,对于细胞执行程序性死亡（如程序性坏死）的调控有重要作用。某些研究证实microRNA可以靶向控制程序性坏死通路中的关键蛋白表达调控程序性坏死的发生。因此,我们运用microRNA基因组学分析技术筛选针对硒缺乏症中的心肌坏死特异性的microRNA。通过应用高通量测序、双荧光素酶报告系统和实时荧光定量PCR等检测手段,在缺硒鸡的心肌组织中筛选并验证坏死心肌特异性的microRNA以及其靶基因。本试验在复制缺硒肉鸡心肌组织坏死模型和鸡心肌细胞miR-200a-5p过表达/抑制模型的基础上,分析miR-200a-5p与心肌组织细胞坏死的类型和相关性,明确miR-200a-5p在鸡缺硒性心肌细胞程序性坏死中的信号转导通路。试验结果表明:1.在建立鸡原代体外培养心肌细胞模型基础上,成功构建了miR-200a-5p过表达/抑制模型。利用生物信息学预测软件Targetscane和MiRDB以及蛋白组学的检测结果预测了miR-200a-5p的靶基因,通过构建双荧光素酶报告基因系统、RT-PCR和Western Blot的方法验证了RNF11是miR-200a-5p的靶基因。2.结合microRNA组学、转录组学以及蛋白组学检测结果以及RT-PCR和Western Blot技术验证,低硒饲料能够引起鸡心肌组织中的miR-200a-5p表达显著上调和RNF11表达显著下调,TNF炎症通路相关炎症基因表达上升,程序性坏死基因RIP1、RIP3、MLKL和FADD表达量显著上调,Caspase 8表达量显著下调,结合心肌组织学观察结果证实心肌发生程序性坏死。心肌组织发生氧化应激,MAPK通路激活,SOD、T-AOC、GSH活性下降,H2O2增多。上述结果表明在缺硒心肌组织中miR-200a-5p激活伴随炎症和氧化应激的发生,并且心肌组织发生的坏死类型为程序性坏死。3.在建立鸡原代体外培养心肌细胞miR-200a-5p过表达/抑制模型的基础上,用程序性坏死激活剂（z-VAD-fmk/TNF-α）、程序性坏死抑制剂（Nec-1）和抗氧化剂（BHA）处理细胞,结果表明心肌细胞敲低miR-200a-5p后,细胞中ROS的水平、氧化应激、炎症反应和心肌程序性坏死率下降,加入程序性坏死激活剂后,程序性坏死率仍然降低。心肌细胞过表达miR-200a-5p则表现出相反的结果,上述结果表明miR-200a-5p能够通过抑制RNF11表达引起心肌细胞发生炎症反应与氧化应激并且诱导心肌细胞程序性坏死。综上所述,低硒日粮能够引起miR-200a-5p表达量升高,RNF11表达量降低,伴随发生炎症反应和氧化应激,诱导心肌组织发生程序性坏死。体外试验证实,RNF11为miR-200a-5p的靶基因,miR-200a-5p能够抑制RNF11表达,miR-200a-5p过表达引起心肌细胞ROS含量、氧化应激、炎症反应和细胞程序性坏死增加。并通过研究这一调节机制,我们发现microRNA可以通过抑制RNF11的转录诱导心肌细胞发生程序性坏死。我们的结果揭示了一种由miR-200a-5p、RNF11与膳食硒含量组成的新的心肌坏死调节机制,我们的结果为理解心肌坏死发病机理提供了新的见解。