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本研究从研究银屑病皮损角质形成细胞过度增殖、新生血管和炎症细胞的浸润角度,采用免疫组织化学、抗体夹心酶联免疫吸附和流失细胞分析仪等方法,检测各类粘附分子和VEGF的表达。选择血管内皮细胞(HUVEC)原代培养和角质形成细胞的永生化细胞株HaCaT的基础上,以MTT比色法研究伊曲替酸对HUVEC和HaCaT增殖的调控作用,并通过流式细胞技术检测各个细胞周期的变化。依据中医辨证论治自组复方中药“七皮饮”治疗银屑病,采用抗体夹心酶联免疫吸附方法,检测治疗前后γ-IFN和VCAM-1。结果如下:采用免疫组织化学和抗体夹心酶联免疫吸附等方法,检测银屑病患者皮损组织和血清各类粘附分子和VEGF的表达,运用统计学手段分析实验结果,获得银屑病皮损组织中检测分子强弱排序为VCAM-1> PECAM-1> ICAM-1> VEGF> LFA-1> VLA-4> Mac-1。表明银屑病皮损真皮乳头毛细血管扩张、迂曲、通透性增加和血管内皮细胞增生与细胞因子密切相关程度。PECAM-1,可以作为银屑病皮损真皮乳头血管增生的敏感性标记。建立VCAM-1和ICAM-1判别诊治银屑病结果的敏感度和特异度实验室指标。本实验结果为治疗银屑病提供药物的作用靶点;为临床判别银屑病发生、发展和转归的判别指标,及用于研究治疗银屑病药物的药理作用的判别指标。采用免疫组织化学和流失细胞分析仪等方法,检测到进行期银屑病患者皮损CLA和E选择素的表达均呈强阳性,而非皮区和正常皮肤表达微量。证明银屑病皮损中有大量记忆的CLA+T细胞。检测到进展期银屑病患者外周血中CLA+ CD3+T、CLA+ CD4+T和CLA+ CD8+T细胞表达明显高于正常人和静止期患者。进一步表明进行期银屑病患者血循环中,有大量被激活的记忆CLA+ T细胞。这些记忆CLA+ T细胞不断定位向皮肤归巢,引发一系列细胞免疫异常,最终导致银屑病皮损发生。通过体外模拟感染刺激使记忆的CLA+T细胞增殖,更进一步证实CLA+T细胞是引起银屑病发生和加重的重要途径。选择阻断记忆CLA+ T细胞定位向皮肤归巢为药物作用靶点,将是开发治疗银屑病新药的又一有效途径。。以MTT比色法和流式细胞技术检测伊曲替酸对HUVEC和HaCaT增殖和细胞周期调控,结果发现伊曲替酸对内皮细胞的调控为先增殖后抑制的趋势,对角质形成细胞株HaCaT是直接抑制的作用,其作用都与药物浓度和作用时间相关。另外,伊曲替酸使内皮细胞的周期阻滞于G1期,而HaCaT的周期被阻滞于S期,对细胞周期的影响同样与药物浓度和作用时间相关。运用抗体夹心酶联免疫吸附检测复方中药“七皮饮”对银屑病患者外周血中的γ-IFN和VCAM-1的含量表达的作用。结果表现减少其表达量。表明“七皮饮”不仅抑制表皮角质形成细胞过度增殖,而且还可以抑制真皮微血管新生,降低血管的通透性。发现“七皮饮”具有抑制角质形成细胞增殖增值率,使细胞阻滞在G1期。其中的地骨皮具有促进细胞增殖,而桑白皮则抑制细胞增殖,显示了君药二者的一促一抑,相生相克。“七皮饮”即表现出抑制细胞的作用又不至于过分的抑制细胞的生长,从中西医结合的角度达到治疗的目的。进一步证明复方中药方具有多靶点、多层次的药理作用。