论文部分内容阅读
急性脊髓损伤(Acute Spinal Cord Injury,ASCI)是威胁人类生命的主要损伤性疾病之一。其发病率、致残率、死亡率都很高,每年各国对本病的基础和临床研究均投入了大量的精力,但是其发病机制尚不清楚,仍处于探索阶段。对于急性脊髓损伤的临床治疗,目前还没有特效的方法。针刺作为治疗急性脊髓损伤的有效方法之一,以其独特性发挥了重要作用。本研究选用改进的Allen’s打击装置制造脊髓损伤大鼠模型,旨在应用适宜频率参数的电针治疗,探讨其改善急性脊髓损伤大鼠受损脊髓状态的分子机制。对损伤部位的脊髓组织进行SOD含量的检测;取损伤部位脊髓组织进行蛋白质组学分析,找出相关差异蛋白。探讨电针在该模型上产生疗效的可能的神经化学机制,并在蛋白质组学的角度上探讨其机制,并现将主要结果简述如下:1.损伤局部组织SOD含量:24h后对大鼠进行治疗,然后处死动物取出损伤段脊髓,测定SOD的浓度。发现(1)①与空白组比较:模型组和药物组含量下降,且有极显著性差异。②与空白组比较:电针组含量下降,有显著性差异。(2)与模型组比较:电针组和药物组无差异,但是有增加的趋势。2.对大鼠脊髓全蛋白质进行双向凝胶电泳,借助Mascot软件从中找出差异表达蛋白质点。应用基质辅助激光解吸电离串联质谱,对差异表达的蛋白质点进行鉴定。结果:成功发现个8蛋白质点,表达水平具有显著性差异变化。在已发现的蛋白点中,成功鉴定出7种蛋白质:①磷酸丙糖异构酶(triosephosphate isomerase)(TPI)②还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-脱氢酶复合体Ⅰ-亚复合物10(subcomplex 10)③磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglycerate mutase 1)④核苷二磷酸激酶(NDPK)⑤E2泛素连接酶(E2N)⑥神经丝亚单位(NF-M)⑦DJ-1蛋白。通过本动物实验可见,针刺对早期急性脊髓损伤具有一定的治疗效果。鉴定出的蛋白质可能通过细胞的能量代谢,蛋白质的合成和水解,自由基的产生和清除,及其神经细胞骨架重建等途径参与了ASCI的损伤及修复过程。