论文部分内容阅读
目的：人巨细胞病毒（Human cytomegalovirus，HCMV）是一种典型的β疱疹病毒，在人群中广泛感染，HCMV UL23基因属于US22基因家族成员，它的编码产物pUL23大小约为33 kDa，为病毒皮层组分之一。实验室前期结果已经表明，pUL23能够抑制γ干扰素依赖的JAK/STAT1信号途径，抵抗干扰素抗病毒作用，γ干扰素途径调控着上千个基因，包括多种抗病毒基因的表达。本课题旨在探讨pUL23对干扰素刺激基因表达的影响，为阐明pUL23能够抵抗γ干扰素抗病毒的分子机理奠定基础。 方法：1）生物信息学方法预测受人巨细胞病毒调控的γ干扰素刺激基因，作为后续研究的候选基因。2）人巨细胞病毒Towne株和缺失UL23基因的Towne-delUL23病毒株分别感染HFF细胞，γ干扰素处理前后，采用q-PCR技术检测干扰素刺激基因的mRNA表达水平，分析病毒感染过程中pUL23对干扰素刺激基因表达的影响。 结果：1）NextBio平台筛选出9个受γ干扰素调控，基因表达增加改变倍数较大，并与巨细胞病毒感染相关的γ干扰素刺激基因，IFI44L、IFP35、NMI、IFIT3、STAT1、IRF1、IRF7、OAS1、SP110和1个对γ干扰素信号途径具有负调控作用的基因UBE2I，作为后续研究病毒蛋白pUL23调控的候选基因。2）Towne病毒感染组与Towne-delUL23病毒感染组相比，q-PCR实验数据表明①对于IFI44L、IFP35、NMI、STAT1基因，γ干扰素未处理时，pUL23对IFI44L、IFP35、NMI、STAT1基因的表达无显著性影响，γ干扰素处理后，pUL23抑制IFI44L、IFP35、NMI、STAT1基因mRNA表达；②对于OAS1、SP110基因，γ干扰素未处理时，pUL23促进OAS1、SP110基因mRNA表达，干扰素处理后，pUL23抑制SP110 mRNA表达，但是，pUL23或促进或抑制OAS1基因的表达；③对于IRF1基因，γ干扰素处理前后，pUL23均能抑制IRF1基因mRNA表达；④对于IRF7、IFIT3基因，γ干扰素未处理时，pUL23促进IRF7、IFIT3基因mRNA表达，然而γ干扰素处理后，pUL23对IRF7、IFIT3基因的表达无显著性影响；⑤对于UBE2I基因，γ干扰素处理前后，pUL23对UBE2I基因的表达均无显著性影响。 结论：人巨细胞病毒编码蛋白pUL23可以选择性调控干扰素刺激基因的表达，该研究为揭示pUL23在HCMV感染过程中的功能奠定了基础。