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既往大量研究提示乙肝病毒和肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)发生关系密切,然而关于乙肝病毒对肝细胞癌侵袭转移影响的研究却很少;近年来,鉴于发现乙肝病毒X基因编码的HBx蛋白可以激活多个与肿瘤侵袭转移相关的原癌基因(如c-Src等)及转录因子,HBx蛋白在肝细胞癌侵袭转移中的调控作用开始引起关注。由于在HBx蛋白所激活的诸多原癌基因/信号通路中,酪氨酸激酶家族的c-Src是介导上皮-间叶样表型转化的关键因子之一,因此我们推想:HBx蛋白是否可以通过激活c-Src来诱导肝癌细胞发生上皮-间叶样表型转化,从而促进其侵袭转移呢?上皮-间叶样表型转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)指上皮细胞获得了成纤维细胞样表型,其特征是细胞标志物改变和细胞内骨架重排等,其结果是细胞间粘附减弱、细胞运动能力大大增强。为了检验我们的假想,本实验设计如下:首先,在肝细胞癌组织标本上,用免疫组化方法检测了HBx、活化型c-src、上皮标志物(E-cadherin、β-catenin、α-catenin)、间叶标志物(N-cadherin、vimentin、fibronectin)在肝细胞癌组织的表达,并评价其临床意义;然后,构建含HBx基因的重组腺病毒载体,包装产生腺病毒,并进一步感染SMMC-7721细胞。观察转染HBx基因后的SMMC-7721细胞的形态变化,并检测上皮标志物和间叶标志物的表达情况。再给予c-src激酶抑制剂PP2和阴性对照PP3,评价HBx蛋白是否通过活化c-Src来发挥诱导作用。最后,将腺病毒感染的SMMC-7721细胞接种到裸鼠皮下和脾脏,评价HBx蛋白对肝癌细胞在裸鼠体内生长和转移的影响。本组实验主要的结果及结论如下:1.76例肝细胞癌组织中,有52例(52/76, 68.4%)HBx表达阳性,有38例(38/76, 50%)活化型c-Src表达阳性;上皮标志物在肝癌细胞膜的表达情况是,26例E-cadherin表达缺失(26/76, 34.2%),18例α-catenin(18/76, 23.7%)表达缺失,15例β-catenin(15/76, 19.7%)表达缺失;间叶标志物在肝癌细胞浆的表达情况是,N-cadherin有42