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内蒙野丁香(Leptodermis ordosica H.C.Fu et E.W.Ma)隶属于茜草科(Rubiaceae)野丁香属(Leptodermis Wall),早生矮小灌木,为内蒙古二级保护植物。其植株具有较高的观赏价值,并且具有药用价值。本文对内蒙野丁香离体系统做了初步研究,了解不同外植体、培养基等条件对内蒙野丁香组织培养的影响,筛选出了进行组织培养的最适外植体和最适培养基配方,基本弄清了其体细胞胚发生的途径,为进一步的基因工程改良、人工种子的开发利用等研究提供了基础资料。同时建立了内蒙野丁香的细胞悬浮培养体系,为扩大和保护珍稀濒危植物资源,生产次生代谢产物提供理论基础。
主要研究结果有四点:1.筛选出内蒙野丁香诱导愈伤组织的最适外植体是叶片,对叶片进行消毒的最适方案是用70%酒精15s+0.1%HgCl<,2>消毒2min,有效材料获得率可达到90%以上。2.筛选出诱导愈伤组织最适培养基组合为:MS+2mg/L 6-BA+10mg/L IAA;最适继代培养基为:MS+2.0mg/L6-BA+5.0mg/L IAA;最适分化培养基为;MS+4.0mg/L 6-BA+2.0mg/LIAA;最适生根培养基为:MS+0.01mg/L NAA。3.通过组织细胞学方法研究内蒙野丁香体细胞胚的起源与发生部位,发现内蒙野丁香体细胞胚多为单细胞起源,愈伤组织表面发生,体细胞胚经过球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚而发育成再生植株。4.以选择黄绿色颗粒状的愈伤组织进行细胞悬浮培养为最佳,培养基选择MS+IAA 5.0mg/L/+6-BA 2.0mg/L。在细胞悬浮培养过程中,细胞生长曲线呈近“S”型,对数生长期在接种后的9-15天。