【摘 要】
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以蚯蚓的生态适应为理论基点,研究了蚯蚓Eisenia fetida的两种抗菌肽.通过硫酸铵沉淀和超滤等,将蚯蚓匀浆分成6个粗组分,即30﹪～60﹪硫酸铵沉淀大于10KDa（Ⅰ）,10KDa～1KDa（Ⅱ）及小于1KDa
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以蚯蚓的生态适应为理论基点,研究了蚯蚓Eisenia fetida的两种抗菌肽.通过硫酸铵沉淀和超滤等,将蚯蚓匀浆分成6个粗组分,即30﹪～60﹪硫酸铵沉淀大于10KDa（Ⅰ）,10KDa～1KDa（Ⅱ）及小于1KDa（Ⅲ）三组,60﹪～90﹪硫酸铵沉淀大于10KDa（Ⅳ）、10KDa～1KDa（Ⅴ）及小于1KDa（Ⅵ）三组.通过抑菌圈法和微量稀释法检测抗菌活性.在初步筛选的基础上又经硫酸铵沉淀、超滤、阳离子交换分离和反相FPLC,得到了两种新的蚯吲抗菌肽F-1与F-2.分子量经电喷雾离子源质谱（ESI-MS）测定为535.27Da和519.27Da.串联质谱（MS/MS）数据表明F-1的肽序列为Ac-Ala-Met-Val-Ser-Ser,F-2的肽序列为Ac-Ala-Met-Val-Gly-Thr.最小抑菌浓度（MIC）实验表明,F-1与F-2对鹑鸡肠球菌Enterococcus gallinarum、绿脓杆菌Pseudomonas pyocyanea、鲍氏不动Acinetobacter baumanii、土生克雷伯菌Klebsiella terrigena的MIC分别为11.4mg/L和12.85mg/L,对粪肠球菌Enterococcus faecalis的MIC分别为22.8mg/L和25.68mg/L.对真菌白色念株菌Candida albicans没有表现为完全的抑制作用.利用MTT法和扫描电镜,对F-1和F-2对体外培养的MGC803胃癌细胞的杀伤作用及其机理进行了研究.F-1与F-2在0.02mol/L的PB（pH6.0）中形成多聚体,对于F-1与F-2这样仅含5个氨基酸残基的抗菌肽来讲,多聚体及多聚体孔道的形成是其作用机理之一.两种新的蚯蚓抗菌肽F-1和F-2不仅有高效广谱的抗菌活性,而且对癌细胞也有作用,这不仅丰富了蚯蚓活性成分的研究,而且在抗菌肽研究领域中有重要意义.同时,在当前抗生素使用泛滥,抗药性细胞不断增多的背景下,F-1与F-2的发现有重要的实际应用价值.
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