【摘 要】
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目的:探讨前列腺癌细胞中miR-143低表达与MAPK信号通路中KRAS被抑制的关系,研究miR-143高表达对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响及其作用机制。方法:通过RT-PCR和Western blott
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目的:探讨前列腺癌细胞中miR-143低表达与MAPK信号通路中KRAS被抑制的关系,研究miR-143高表达对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响及其作用机制。方法:通过RT-PCR和Western blotting的方法检测miR-143及其靶基因KRAS蛋白在前列腺癌组织中的表达;用MTT方法和集落形成和迁移实验分别研究miR-143对激素非依赖性前列腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。结果:1、miRNA-143和KRAS基因表达水平呈负相关(R= -0.707, P < 0.05)。HRPC的组织中miRNA-143表达下调,KRAS基因表达上调。2、转染miR-143的DU145细胞和PC3细胞培养48h和72h后明显抑制细胞增殖(P<0.05),而培养24h后抑制作用无统计学差异(P>0.05)。miR-143对DU145细胞和PC3细胞的克隆形成和细胞迁移具有明显的抑制作用(P<0.05)。3、KRAS、p-ERK1/2和Cyclin D1蛋白的表达水平明显下降。KRAS报告基因质粒和miR-143共转染的DU145细胞中荧光素酶活性显著下降,表明miR-143是通过结合到KRAS基因的3’UTR调节蛋白的表达。结论:我们的研究进一步证实miR-143在HRPC组织中低表达和其在前列腺癌的发生和发展中的抑制作用。miR-143通过调节KRAS、p-ERK1/2和Cyclin D1的表达抑制细胞的增殖和迁移,本研究为前列腺癌的临床治疗提供了新的分子生物学机制。
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