论文部分内容阅读
目的1.以甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)作为研究对象，用RT-PCR方法检测样本中的HAV RNA，同时确定是否可以用该法从人血和胆汁样本中检出HAV RNA，确定实验的可靠性。2.采用血清学实验技术检测猪的血清流行病学特征。3.使用上述的RT-PCR方法确定猪全血和胆汁中的病毒感染是否存在，以探讨猪作为甲型肝炎病毒感染动物模型的可能性。方法1.用甲型肝炎减毒活疫苗作为样本，使用RT-PCR方法扩增样本中的HAVRNA。2.收集人的全血样本27份，胆汁样本79份，使用RT-PCR方法扩增样本中的HAV RNA。3.采集大理市的屠宰猪的血样，每头猪采血6ml×2管，统一编号，其中一管用于分离血清共181份；另一管用抗凝剂抗凝，采血后在-20℃保存待用。血清用于检测HAV抗体，抗凝血用于RT-PCR检测HAV RNA。4.单纯随机抽取采集136份大理市屠宰场新鲜的猪胆汁，使用RT-PCR方法扩增样本中的HAV RNA。结果1.用甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)作为样本，用RT-PCR方法成功的扩增出HAV RNA。2.使用RT-PCR检测从医院中收集的血液、胆汁的样本中共扩增出阳性血液样本2份，阳性胆汁样本1份，检出率分别为7.41%和1.17%。3.血清学标志物的检测结果将猪血清分为三种组合模式，组合模式1（HAVIgM阳性，HAV IgG阴性）；组合模式2（HAV IgM阴性，HAV IgG阳性）；组合模式3（HAV IgM阴性，HAV IgG阴性），他们的构成比分别为：6.48%，58.01%，35.91%。说明用屠宰猪的HAV抗体阳性率较高，这种组合模式与人类感染模式类似。4.用RT-PCR方法，在7份猪的新鲜全血样本和136份猪的胆汁样本中均未扩增出HAV RNA。结论1.成功建立起RT-PCR检测待测样本中的HAV RNA的方法。2.人全血样本和胆汁样本中HAV RNA的检出率分别为7.41%和1.17%。3.屠宰猪血清样本中检测出HAV的抗体阳性率较高，抗体组合模式与人的感染模式类似。4.用RT-PCR在屠宰猪的全血和胆汁样本中未检出HAV RNA，尚不能证实猪可以感染人的HAV。