壳聚糖的改性研究及其包埋蚯蚓血红蛋白纳米微粒的制备

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用双水相萃取和Q-sepharose离子交换层析等从蚯蚓中提取纯化蚯蚓血红蛋白。具体考察了提取纯化蚯蚓血红蛋白的各种实验条件和纯化品的理化性质。并通过改性后的壳聚糖衍生物-ACS,对蚯蚓血红蛋白进行了包埋、制备纳米微粒的研究。 实验结果表明:蚯蚓血红蛋白的提取纯化主要取决于其等电点、过层析柱时缓冲液体系的pH等实验条件。通过SDS-PAGE、血红素含量测定和动物实验等结果证明双水相萃取和离子交换层析从蚯蚓中提取纯化的血红蛋白具有很高的纯度和载氧能力。 实验证明用丙稀酸改性后的壳聚糖衍生物ACS具有很好的水溶性和生物相溶性。通过正交设计对壳聚糖进行改性实验条件进行了分析。实验结果表明:壳聚糖氨基取代度主要取决于反应温度、丙稀酸/壳聚糖的用量比和反应时间。本实验成功制备了N-羧乙基壳聚糖衍生物。并通过茚三酮法、红外光谱和核磁共振等对改性后的产品进行了定性分析。 用自制改性后的壳聚糖衍生物和离子交联剂三聚磷酸钠对蚯蚓血红蛋白进行包埋制备纳米粒子,并通过TEM透射电镜对其形貌进行了观察。具体考察了包埋率和包埋后蚯蚓血红蛋白在缓冲液和人工模拟胃液中的释放行为,并建立了模拟释放曲线。
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