调节性T细胞在CAP发生中作用的实验研究

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目的:在成功构建大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型的基础上,探讨调节性T淋巴细胞比例在其外周血中的变化及意义。方法:①选取体形相近Wistar雄性大鼠24只,体重400g左右,然后采用简单随机法分为4组,分别为高剂量模型组,低剂量模型组,媒介组和空白对照组。②对模型组大鼠在无菌条件下行去势术,术后腹部皮下注射17β-雌二醇,连续注射30天;媒介组腹部皮下注射芝麻油,空白对照组大鼠不做任何处理,30天后同模型组大鼠一起处理。③一个月后,大鼠注射0.3%戊巴比妥钠进行麻醉,然后用肝素钠采血管进行采血,并分离前列腺组织。④把分离后的前列腺组织先用分析天平称其湿重,再放入浓度为4%左右的甲醛溶液中进行固定,HE染色后,在光学显微镜下进行观察其组织的变化情况。⑤将采好的一半新鲜血液尽快用流式细胞仪分别检测CD4CD25T淋巴细胞群、CD8CD28T淋巴细胞群和CD4CD28T淋巴细胞群的比例。⑥将采好的另一半新鲜血液马上进行离心,然后取上清液,并做好相应标记,再用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞因子IL-4和INF-γ的表达情况。采用SPSS17.0软件对数据结果进行分析处理。结果:⑴与媒介组和空白对照组大鼠前列腺组织的湿重相比较,高剂量模型组和低剂量模型组大鼠前列腺组织的湿重明显下降(P<0.01);在光学显微镜下可见模型组前列腺组织有明显腺上皮萎缩,间质有炎细胞浸润等炎症表现。⑵与媒介组大鼠和空白对照组大鼠外周血中CD4~+CD25~+T细胞比例相比较,高剂量模型组大鼠外周血中CD4~+CD25~+T细胞比例明显下降(P<0.01),低剂量模型组大鼠外周血中CD4~+CD25~+T细胞比例也下降(P<0.05)。以及与对照组大鼠外周血中CD8~+CD28-T细胞比例相比较,高剂量模型组和低剂量模型组大鼠外周血中CD8~+CD28-T细胞比例均下降(P<0.05)。模型组CD8~+CD28-T细胞比例变化与CD8~+T细胞比例变化呈正相关。四组大鼠外周血中CD4~+CD25-T细胞比例、CD4~+CD28~+T细胞比例和CD8~+CD28~+T细胞比例无差别(P>0.05)。⑶IL-4和INF-γ在四组中的表达量相比较无变化(P>0.05)。结论:1)采用17β-雌二醇成功构建大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型。2)CD4~+CD25~+调节性T细胞和CD8~+CD28-调节性T细胞参与慢性非细菌性前列腺炎的发生,为大鼠慢性非细菌性前列腺炎发病机制的进一步研究奠定基础。
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