口腔癌缺失(DeletedinOralCancer-1，DOC-1)基因是近年来被证实的口腔癌中具有抑癌作用的基因。1999年，酵母双杂交实验发现与DOC-1相关的另一候选抑癌基因DOC-1R(DOC-1related)。以往的很多实验证明，这两个蛋白无论序列还是功能上都非常相似。然而，其具体结构以及与其他重要蛋白相互作用的机制一直还不清楚，PDB库中也未见其相关同源结构的报道。 我们将人DOC-1R蛋白的基因片段克隆至原核表达载体pET-22b(+)中，转化大肠杆菌BL21(DE3溶源菌)，通过IPTG诱导获得高效表达。经过Ni-NTA亲和层析和Superdex75层析柱纯化后，获得纯度达到96％以上蛋白。用质谱进行精确分子量测定，动态光散射进一步检测了其均一性。结果表明：DOC-1R质谱测定的分子量为14091.23KD；动态光散射结果显示蛋白均一性高达99.9％，可用于晶体生长；采用悬滴气相扩散法在多个条件下得到了DOC-1R的微晶。为解决相位问题，我们同时进行了硒代蛋白的制备，其分离纯化方法按母体类似进行，同时进行了初步的晶体条件筛选，并得到针晶。本文为DOC-1R的性质研究和最终三维结构解析奠定了坚实的基础。 真核生物体内，mRNA降解的过程主要由Ccr4-Not复合物来完成。人CAF1(Ccr4associatedfactor1)蛋白是Ccr4-Not复合物的重要组成部分之一，也是酵母Pop2的同源蛋白。尽管酵母Pop2蛋白C端结构域的三维结构被解析了出来，但在几个关键的氨基酸的结构上以及酶活和催化机理上都存在着很大的差异。因此，我们构建表达出人CAF1蛋白，进一步进行分离纯化和结晶，希望最终能解析出其三维结构，从结构生物学角度解释一系列问题。 通过自行设计一对引物，从构建好的GST融合表达载体上，PCR扩增出所需目的因片断，重新构建到自行改造得到的p28b载体中表达，经Ni-NTA亲和层析柱初步纯化后，再通过MiniQFastFlow离子交换柱和Supedex75分子筛进一步纯化，得到了适合晶体生长的高纯度蛋白。构建得到p28b-CAF1重组质粒；纯化得到了适体生长的高纯度蛋白。纯化得到的高纯度和均一性人CAF1蛋白，为后续的结构解析和功能研究奠定了坚实的基础。