持续弹性外牵引对小型猪乳头碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子表达的影响

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目的:观察持续弹性外牵引过程中雌性小型猪乳头及其支撑组织中碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b-FGF)和转化生长因子(transforming growthfactor-beta1,TGF-β1)表达的变化,进一步探讨持续弹性外牵引刺激乳头内支撑组织增殖的作用机制,为更好的改进和利用持续弹性外牵引技术矫正乳头内陷提供理论依据。方法:选用3只体重及乳头无明显差别的雌性健康贵州从江小型猪(共36个乳头)。顺序编号后,每只小猪的1-4号乳头作为空白对照,其余乳头安置自制弹性可调式牵拉矫治器进行持续牵引。于牵引后第2w,4w,8w,12w在全麻下分别切取每只小型猪的1个空白对照乳头(1-4号)和2个被牵引乳头(5-12号)。用10%中性福尔马林溶液浸泡组织48小时,再常规脱水、浸蜡、制备石蜡包埋标本,切片后分别进行HE染色和免疫组化染色,观察牵引前及牵引不同时期乳头内组织学变化、组织中碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况,利用图像分析软件进行定量分析。结果:组织学观察见随着牵引的进行,组织内成纤维细胞和毛细血管增生明显,成纤维细胞排列紧密,且具有方向性。免疫组化染色,各组乳头b-FGF及TGF-β1均有阳性表达,对照组各时期两种生长因子阳性表达均不强,散在分布。牵引后b-FGF及TGF-β1的表达开始增加,各时期同对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。b-FGF表达在牵引2W后开始增多,4W时阳性表达达到最高水平,以导管腺泡上皮细胞和血管平滑肌细胞中为主,呈强阳性;成纤维细胞密集区表达也较强,分布广泛;血管内皮细胞表达较弱。之后b-FGF的表达开始减弱,但相对于各时期对照组仍能维持高水平表达。4w牵引组b-FGF同12w牵引组比较有明显差异(P<0.05)。TGF-β1的表达在牵引2W后达到高峰,导管腺上皮细胞的胞浆和成纤维细胞中可见强阳性表达;血管内皮细胞表达较弱;血管平滑肌细胞中几乎无表达。2W后各细胞中的表达强度开始降低,但仍高于对照组水平。成纤维细胞数量增加,排列紧密,逐渐开始呈现方向性,细胞内及细胞外间质中的TGF-β1阳性分布更广,但染色强度无明显变化。2w牵引组TGF-β1的表达同8w,12w牵引组比较有明显差异(P<0.05)。牵引过程中b-FGF和TGF-β1表达具有正相关性。结论:持续弹性牵引可刺激小型猪乳头组织中b-FGF和TGF-β1的合成和分泌增加,b-FGF和TGF-β1相互作用,协同刺激胶原增殖,血管数量增多,从而达到增加乳头下支撑组织的作用,且牵引力作用持久,效果稳定,是一种值得推广的矫治乳头内陷的方法。
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