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铁皮石斛(Demdrobium officinale Kimura et Migo.)是兰科(Orehidaeeae)石斛属(Dendrobium)名贵中药,有降低血糖、抑制肿瘤、滋养肌肤、延年益寿等功效,对消化、呼吸、心血管系统和眼科疾病有明显疗效。本论文以云南软角铁皮石斛为材料,以人工授粉获得的成熟未裂蒴果种子种子为外植体,建立铁皮石斛组培快繁体系;同时,通过对栽培环境和病虫害防治技术研究,研究铁皮石斛栽培关键技术。主要研究结果如下:1、铁皮石斛种苗组培产业化快繁技术:(1)材料:采用授粉后生长190d成熟未裂蒴果种子为外植体,种子萌发培养基为MS+NAA0.2mg/L+香蕉泥7%+AC1.0g/L,培养60-80d,萌发率90%,繁殖系数15倍。(2)原球茎继代增殖和分化培养基:原球茎继代增殖和分化培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+香蕉泥7%+AC1.0g/L,一次继代需时60d;继代2-4代,芽苗分化率80%、增殖系数6.0倍/60d;继代5-7代,芽苗分化率90%、增殖系数4.0倍/60d;继代总次数应少于10代。(3)生根培养基:生根培养基为1/2MS+NAA0.1-0.8mg/L+AgNO30.1-0.6mg/L+香蕉泥7%+AC1.0g/L,培养60d,生根率100%,在此培养基上,生根苗健壮、抗逆性强,移栽时间增加50d。(4)组培技术小结:根据这一技术,1瓶无菌的播种材料,通过一个育苗周期后,理论上可以扩繁种苗7900-360000瓶,可得种苗40万-1800万株。(5)炼苗和移栽:将生根瓶苗在温室大棚内炼苗7-20d,以直径2-5cm、消毒好的松树皮颗粒为基质,于春秋两季移栽于大棚内,成活率95%以上。(6)变异类型:观测发现铁皮石斛组培苗产业化快繁中有两类变异类型,分别研究它们的致变异因素并找出相应的规避措施,科学指导种苗生产、避免造成巨大的财产损失。2、铁皮石斛栽培关键技术:(1)绿色生产产地评价:环境空气、土壤和灌溉水质量检测结果显示,广西阳朔大源林场适合作为绿色铁皮石斛种植基地。(2)栽培基质:移栽基质以直径2-5cm、腐熟或消好毒的松树皮为佳,基质湿度以表面偏干、内里湿润为好,空气相对湿度早晚保持在80%左右。(3)铁皮石斛组培苗移栽时间:在桂林地区,每年的5-6月及10-11月是铁皮石斛组培苗合适的移栽季节,成活率在90%以上,且5-6月优于10-11月。(4)铁皮石斛产量积累及质量形成过程:铁皮石斛种植3年后,分蘖数是定植时的5倍,重量是定植时的40倍以上:而多糖含量在18个月后达到采收标准;种植两年后,铁皮石斛多糖含量稳定在较高的含量范围(约300%)。(5)种植铁皮石斛的最佳光环境:透光率为55%的条件下,铁皮石斛叶绿素a和b含量相对较高、净光合速率最大、生物量最高、也利于多糖的形成和积累,因此,55%的透光率是铁皮石斛种植的最佳光环境。(6)铁皮石斛主要病虫害及其防治:铁皮石斛约有病虫害14种,危害严重的有6种;对其中危害严重的四类病虫害的发生规律进行了研究,并提出相应的防治方法和建议。