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目的:前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)是指当癌淋巴播散时首先累及的淋巴结,常为一个或数个淋巴结,其概念及检测方法被广泛应用于许多肿瘤的研究,如黑色素瘤、乳腺癌、胃癌、甲状腺癌及宫颈癌等,特别是在乳腺癌的研究中取得一定的成功。目前,结直肠癌前哨淋巴结定位活检研究尚处于初级阶段,存在许多争议。本研究旨在探讨前哨淋巴结体内定位活检术在结直肠癌中的可行性及SLN微转移检查在提高结直肠癌病理分期、预测区域淋巴结转移状态中的价值。方法:(1)前哨淋巴结定位技术研究2008年9月至2010年2月在赣南医学院第一附属医院行根治性手术的64例结直肠癌病人,通过异硫蓝蓝染法定位其前哨淋巴结;(2)胸苷酸合成酶(thymidylnate synthase,TS)在结直肠癌中的表达采用免疫组织化学P-V法检测64例结直肠癌及26例距结直肠癌3cm左右的结直肠组织的TS蛋白表达情况;(3)TS在前哨淋巴结中的表达对其中52例定位成功的99枚SLN应用常规HE染色联合免疫组化SP法及RT-PCR检测其前哨淋巴结中胸苷酸合成酶的表达。结果:(1) 64例患者中有52例共99枚前哨淋巴结被检测出,检出率为81.3%,前哨淋巴结占淋巴结总数的13.8%,平均每例1.9(1～5)枚。(2)经常规HE染色SLN,52例中有28例患者52枚SLN呈阳性,转移率为53.84%(28/52),其预测区域淋巴结转移的敏感性、特异性、假阴性率及准确率分别为77.8%、66.7%、22.2%及76.9%。(3)TS蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为为56.2(%36/64),显著高于对照组中的23.1%(6/26)(P<0.05),并随着分化程度的降低而增高(r=-0.483,P=0.005);但TS在结直肠癌中的表达与性别、年龄、肿瘤部位及生长方式无关。(4)对前哨淋巴结HE染色阴性的24例患者检测其TS蛋白及mRNA的表达,有14例患者其SLN中TS为阳性表达,阳性率为58.33%(14/24)。(5)前哨淋巴结行微转移检测后其预测结直肠癌区域淋巴结转移状态的敏感性、特异性、假阴性率及准确性分别为95.4%、80.0%、4.5%及96.2%,均显著高于直接的HE染色结果(P<0.05)。结论(1)利用异硫蓝蓝染法检测结直肠癌前哨淋巴结是可行的,前哨淋巴结转移情况可代表区域淋巴结转移情况。(2)TS在结直肠癌组织中呈高表达,并随着分化程度的降低而增高。(3)TS检测能够提高结直肠癌淋巴结转移的检出率,并有助于预测区域淋巴结的转移状态。