蓖麻碱高效降解菌选育及混菌发酵条件的优化

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蓖麻产业的不断发展为我们带来了一种新型的优质蛋白饲料资源——蓖麻饼粕,它丰富的蛋白质、氨基酸及多种矿物质元素是饲料开发的一大亮点,但其中含有的蓖麻碱及变应原毒素限制了它的应用,尤其是蓖麻碱,属于剧毒生物碱,降解处理较为困难。本文从变质的蓖麻饼粕中分离筛选出一株可高效降解蓖麻碱的细菌,并从实验室现有菌株中筛选出一株脱毒效果良好的酵母菌,采用混合发酵方式处理蓖麻饼粕,降解其中的蓖麻碱毒素,经单因素试验和响应面分析优化发酵条件,构建了相应的二次多项式回归模型,获得最佳工艺参数;比较了发酵前后饼粕的营养成分变化,对供试菌株腈水解酶的活性进行了初步研究,主要结果如下。从腐败变质的蓖麻饼粕中筛选出一株高效降解蓖麻碱的细菌BPW,蓖麻碱降解率可达67.04%,经形态观察及生理生化鉴定,初步判断为节杆菌属;从实验室现有降解菌中筛选出一株假丝酵母SJM,其蓖麻碱降解率为66.30%。对两株菌混合发酵处理蓖麻饼粕脱除蓖麻碱毒素进行研究,确定了最佳发酵条件。采用单因素试验及响应面分析法优化发酵条件,以蓖麻碱降解率为响应值得到发酵回归模型,最佳工艺参数为:底物料液比2:5,温度31℃,SJM与BPW菌接种比为1:1(v/v),总接种量14.35%(v/w),培养时间131h,在此条件下,蓖麻碱降解率可达94.19%,变应原降解率91.04%,发酵后饼粕蛋白质总量无明显变化。菌株腈水解酶活性分析表明,实验条件下使用供试菌液3mL, pH=7(BPW菌)或pH=8(SJM菌),反应20min为蓖麻碱降解活性最佳测定条件,此时细菌BPW降解率约41.59%,酵母SJM约39.88%。底物专一性试验推测,两株菌都含有酰胺酶。
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