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1．研究背景及目的上皮—间充质转型(epithelial-mesenchymal transition，EMT)是多细胞生物胚胎发育早期最重要的事件之一。作为一个基本的生理现象，EMT在胚胎发育、慢性疾病的纤维化过程中都起着重要的作用。然而直到最近，随着研究的深入，人们逐渐认识到，上皮—间充质转型这个胚胎发育期间的基本生理学进程可能同样也参与了上皮源性肿瘤的发生及发展，尤其在癌的侵袭和转移方面。因此，对EMT在肿瘤形成和侵袭转移中的作用及其调控机制的研究正越来越受到人们的关注。作为一种EMT的诱导因子，Twist不仅在正常发育中起着重要作用，其在肿瘤转移过程中也有着与其它已知的癌基因一样的生物学效应。目前，有关Twist在胃癌方面的研究几乎是一片空白。因此，我们以低分化胃癌细胞株MKN45为研究对象，采用携带了反义Twist转录因子的质粒对其进行转染，就Twist对MKN45细胞上皮一间充质转型的影响及其在肿瘤侵袭、转移过程中的作用和机制进行了研究。2．方法采用免疫组织化学法研究临床胃癌标本中Twist的表达与临床病理因素的相关性，并且进一步以低分化胃癌细胞株MKN45为研究对象，采用携带了反义Twist转录因子的质粒对其进行转染，应用流式细胞术分析、Real-Time PCR、Western Blot以及Transwell小室等分子生物学技术和方法，深入研究了Twist对MKN45细胞上皮—间充质转型相关基因表达的影响及其在肿瘤侵袭、转移过程中的作用和机制。3．结果Twsit在43例胃癌患者癌组织标本中的阳性表达率(58.14％)明显高于Twsit在12例正常组织中的阳性表达率(25％)，统计学分析结果显示二者存在显著性差异(P＜0.05)。并且，Twist的高表达与胃癌患者是否存在远处转移密切相关。Twist在胃癌MKN45细胞中亦呈高表达，免疫荧光激光共聚焦显示Twist在MKN45细胞内的表达以胞质为主，胞核仅见少量弱表达。反义Twist干扰影响了MKN45细胞的细胞周期、显著抑制了增殖并增加了细胞的凋亡。EMT相关基因的表达亦出现了相应的变化：间充质标志物Fibronectin的mRNA和蛋白表达水平降低，MMP-9的表达被明显的抑制，上皮性标志物E-cadherin的表达显著增加。不仅如此，这些基因和蛋白水平的改变也同时导致了MKN45细胞异质粘附能力、迁移能力以及侵袭能力的降低。4．结论核转录因子Twist可促进胃癌发生转移，反义Twist干扰可诱导胃癌MKN45细胞间充质—上皮细胞转型的发生，并因此而显著降低其侵袭和转移的潜力。