杂色曲霉素（ST）是杂色曲霉、构巢曲霉等曲霉菌属真菌所产生的一种低分子量代谢产物，广泛存在于自然界，是动物和人类食物中最常见的污染物之一。研究表明ST具有致癌性，可诱导不同的实验动物发生肝癌、肺癌、间皮瘤等肿瘤。ST还具有遗传毒性，可直接损伤细胞DNA、与DNA形成加合物，引起基因突变。本研究室前期实验发现，ST可诱发体外培养人胚胃黏膜细胞发生恶性转化以及抑癌基因。P53的突变、过表达；长期灌胃ST可以引起小鼠腺胃黏膜的肠上皮化生和腺上皮不典型增生。
　　 为进一步探讨ST诱导体外培养人胃粘膜上皮细胞周期阻滞的可能机制。本研究在前期实验研究的基础上，观察了不同浓度ST对体外培养永生化胃粘膜上皮细胞GES-1中JNK、ERK、p38和PI3K信号转导通路的影响情况，同时探讨了JNK、ERK和PI3K信号转导通路的激活在ST诱导的GES-1细胞周期G2期阻滞中的作用。
　　 1.杂色曲霉素对GES-1细胞中MAPK和PI3K信号转导通路的影响研究
　　 目的：探讨一次性给予不同浓度ST对体外培养胃黏膜上皮细胞GES-1中JNK、ERK、p38和PI3K/mTOR信号转导通路的影响情况。
　　 方法：取对数生长期GES-1细胞，随机分为6组：溶剂对照组和对照组分别给予DMSO（0.2 ml/L）和生理盐水处理。实验组给予DMSO溶解并以生理盐水稀释的ST，使其终浓度分别为100、500、1000、2000μg/L，处理24 h后，采用Western blot和RT-PCR方法检测GES-1中JNK/p-JNK、ERK/p-ERK、p38/p-p38和PI3K/mTOR/p-mTOR.表达的变化情况。
　　 2.JNK、ERK和PI3K信号转导通路的激活在杂色曲霉素诱导GES-1细胞G2期阻滞中的作用研究
　　 目的：探讨JNK、ERK和PI3K信号转导通路特异性阻断剂预处理对ST处理24 h诱导体外培养GES-1细胞增殖抑制、G2期阻滞及其相关因子表达的影响。
　　 方法：取对数生长期GES-1细胞，分别给予1μM SP600125（JNK信号通路特异性阻断剂）、50μM PD98059（ERK信号通路特异性阻断剂）和1μM LY-294002（PI3K特异性阻断剂）预处理细胞。按1×104个/L接种于96孔板，待细胞进入对数生长期后更换培养基，实验分为5组，即对照组、溶剂对照组、ST处理组、阻断剂组和阻断剂+ST处理组。每孔终体积为200μl，同时设空白对照孔、对照孔和溶剂对照孔，细胞培养24 h后，更换2％低血清DMEM培养基，阻断剂组分别加入SP600125（1μM）、PD98059（50μM）和LY-294002（1μM）。30 min后ST处理组和阻断剂+ST处理组分别给予1000μg/L ST，溶剂对照组和对照组分别给予DMSO（0.1ml/L）和生理盐水处理。细胞处理24 h后，采用MTT检测细胞存活率。
　　 3.JNK、ERK和PI3K信号转导通路的激活在杂色曲霉素影响GES-1细胞蛋白质合成起始因子表达的作用研究
　　 目的：进一步探讨JNK、ERK和PI3K信号转导通路特异性阻断剂预处理，对ST处理24 h诱导体外培养GES-1细胞蛋白质合成障碍的影响。
　　 方法：实验细胞处理、分组（同前）。继续采用Western blot和RT-PCR方法研究了分别给予JNK、ERK和：PI3K信号转导通路特异性阻断剂预处理，ST诱导的体外培养胃黏膜上皮细胞GES-1细胞中eIF4E和4E-BP1的表达及其活性变化，以及CyclinD1蛋白表达的变化情况
　　 结论：
　　 1.杂色曲霉素作用于GES-1细胞24 h，可以激活JNK、ERK和PI3K信号转导通路，同时可以抑制p38信号转导通路。
　　 2.杂色曲霉素可能通过激活JNK和ERK信号转导通路影响GES-1细胞周期分布，诱导G2期阻滞；但PI3K信号转导通路的激活在杂色曲霉素诱导的G2期阻滞中可能发挥反向调节作用。
　　 3.杂色曲霉素作用于GES-1细胞可通过激活JNK、ERK和PI3K信号转导通路而影响Cdc25C-Cdc2/CyclinB1的表达和功能，可能是杂色曲霉素诱导细胞G2期阻滞的机制之一。
　　 4.JNK、ERK和PI3K.信号转导通路的激活可能均参与了ST对体外培养胃黏膜上皮细胞GES-1的影响。但PI3K信号转导通路的激活此过程中可能主要发挥反向调节作用。