研究背景与目的 鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma，NPC)是我国南方地区常见的恶性肿瘤之一，放射治疗是鼻咽癌的首选治疗方式，放疗后失败的主要原因是局部复发和远处转移。根据鼻咽癌临床生物学行为差异我们可以将鼻咽癌的治疗分型分为以下四种：辐射敏感不易转移型，辐射敏感易转移型，辐射抗拒不易转移型，辐射抗拒易转移型。如何根据鼻咽癌的临床生物学行为有针对性地开展个体化治疗是提高鼻咽癌5年生存率和改善生活质量的重要一环，也是临床亟待解决的问题。而采用灵敏的预后指标准确地评估疾病及其生物学行为是实行个体化方案治疗至关重要的一步。 DNA双链断裂(DNA double-strand break，DSB)是电离杀灭肿瘤细胞的主要机制，而同源重组(hoomologous recombination，HR)和非同源性末端连接(DNA nonhomologous end-jioining，NHEJ)是DSB的两条重要修复途径。DNA依赖性蛋白激酶(DNA dependent protein kinase，DNA-PK)是NHEJ的主要成分，在DSB中发挥着重要作用。DNA-PK由Ku70、Ku80、DNA-PKcs三个亚基组成。催化亚基DNA-PKcs可磷酸化ligase Ⅳ、XRCC4从而使得它们活化发挥连接DSB作用。Ku为DNA-PK的调节亚基，在DSB修复中起着辨认、结合排列DNA末端并招募催化亚基DNA-PKcs的作用。它由分子量为70kD的Ku70和80-87kD的Ku80(又叫Ku86)组成，任意一个组份缺陷均会导致DNA-PK活性丧失，而致放射敏感性增加。本课题组一直以来对DNA-PK做了大量的研究工作，并经体外实验证实DNA-PK的表达与鼻咽癌的放射敏感性密切相关。但在复杂的人体肿瘤中，DNA-PK．表达如何，其与预后是否有关，能否指导临床的诊断和治疗?这是临床工作者最关心的问题，也是本研究所要解决的问题。本研究旨在通过检测211例鼻咽癌组织中DNA-PK三亚基Ku70、Ku80、DNA-PKcs的表达情况，并探讨其与鼻咽癌临床病理特征及预后的关系。 材料与方法1.收集1994年7月至1999年12月在中山大学肿瘤防治中心治疗的鼻咽癌病例211例。患者的年龄为13～68岁，中位年龄为48岁。 2.采用免疫组化SP法检测上述患者鼻咽癌组织中DNA-PK的3个亚基Ku70、Ku80、DNA-PKcs的表达情况，据评分结果将其分为高表达和低表达两组(阴性表达归入低表达组)。 3.结合患者的临床及预后资料，用SPSS13.0软件对所有数据进行分析。应用Spearman相关性分析Ku70、Ku80、DNA-PKcs之间表达的关联性；用Pearson卡方检验分析Ku70、Ku80、DNA-PKcs及三者共同高表达与鼻咽癌临床病理特征之间的关系；应用Kaplan-Meier作单因素分析，log-rank检验分析生存曲线的差异；以Cox模型进行多因素生存分析。P＜0.05认为差异有统计学意义。 研究结果 1.Ku70在鼻咽癌组织中高表达的有136例，高表达率为64.5％；Ku70的表达水平与患者的性别、年龄、病理类型、N分期及M分期的相关性无统计学意义(P＞0.05)，与T分期有关(P＜0.05)；单因素生存分析显示，Ku70高表达组总生存率、无瘤生存率、无复发生存率、无转移生存率均低于Ku70低表达组，差异有统计学意义(P＜0.05)；多因素分析显示Ku70是鼻咽癌总生存和无复发生存的独立影响因素(P＜0.05)，而非无瘤生存和无转移生存的独立影响因素(P＞0.05)。 2.Ku80在鼻咽癌组织中高表达的有95例，高表达率为45.0％。Ku80表达高低与患者的性别、年龄、病理类型无显著相关(P＞0.05)，与N分期、M分期有关(P＜0.05)。单因素生存分析显示，Ku80高表达组总生存率、无瘤生存率、无复发生存率、无转移生存率均低于低表达组，但差异均无统计学意义(P＞0.05)； 3.DNA-PKcs在鼻咽癌组织中高表达的有80例，高表达率为37.9％；DNA-PKcs表达高低与患者的性别、年龄、病理类型及N分期的相关性无统计学意义(P＞0.05)，与T分期、M分期有关(P＜0.05)；单因素生存分析显示，DNA-PKcs高表达组总生存率、无瘤生存率、无复发生存率、无转移生存率均低于低表达组，差异有统计学意义(P＜0.05)；多因素分析显示DNA-PKcs表达水平是鼻咽癌总生存、无瘤生存、无复发生存、无转移生存的独立影响因素(P＜0.05)。 4.Spearman相关性分析显示鼻咽癌组织中Ku70、Ku80、DNA-PKcs三者表达两两之间呈高度正相关(P＜0.01)；三者共同高表达的有57例，高表达率为27.0％；卡方检验显示，三者共同高表达与患者的性别、年龄、病理分型的相关性无统计学意义(P＞0.05)，与T分期、N分期、M分期有关(P＜0.05)；单因素生存分析显示，三者共同高表达组总生存率、无瘤生存率、无复发生存率、无转移生存率均低于非共同表达组，差异有统计学意义(P＜0.05)；多因素生存分析显示三者共同高表达是鼻咽癌总生存、无瘤生存、无复发生存、无转移生存的独立影响因素(P＜0.05)。 结论与讨论 1.Ku70表达高低与鼻咽癌的T分期高低有关；初步研究认为Ku70表达高低与鼻咽癌的复发有关，是评价鼻咽癌患者复发与否的有用指标。 2.Ku80表达高低与鼻咽癌的N分期和M分期高低有关，即与鼻咽癌的转移行为有关，但尚未发现Ku80表达与鼻咽癌预后存在显著相关性，有必要扩大样本进一步深入研究。 3.DNA-PKcs表达高低与鼻咽癌的T分期和M分期高低有关；DNA-PKcs的表达水平与患者复发、转移均有关，是影响鼻咽癌患者预后的重要因素，对患者的预后判断有一定的指导意义。 4.鼻咽癌组织中Ku70、Ku80、DNA-PKcs三者表达两两之间呈高度正相关：Ku70、Ku80、DNA-PKcs三者共同高表达与鼻咽癌的T分期、N分期和M分期高低均有关；三者共同高表达与患者复发、转移均有关，是影响鼻咽癌患者预后的重要因素，对患者的预后判断有一定的指导意义。