论文部分内容阅读
目的：研究ECM沉积在IPF纤维化期与疾病进行性发展的关系、IPF纤维化期的病因病机和治法方药、益气通络解毒汤延缓或阻断IPF纤维化期进行性发展的机制，进而探讨ECM与络脉络病的相关性。方法：（1）理论探讨：通过撷菁摘要、去粗存精的文献整理，运用求同存异的对比研究方法，在总结络脉络病的中医学内涵和现代医学阐释、ECM沉积在IPF进行性发展中的作用的基础上，从理论上探讨ECM与络脉络病的相关性、IPF纤维化期的病机，并为从ECM的角度寻求中医药防治肺纤维化的理论依据。（2）实验研究：①建立小鼠肺纤维化模型；②以呼吸频率、体重等观测IPF模型小鼠行为学变化；③病理形态学定量分析小鼠病理学改变；④免疫组化检测coll-1、FN、整合素α5β1、TGF-β1、bcl-2、bax在肺组织中的分布、积分光密度法计算coll-1、FN、整合素α5β1、TGF-β1、bcl-2、bax在肺间质中的阳性面积的IOD值，探寻coll-1、FN与整合素α5β1、TGF-β1、bcl-2、bax在肺间质中的相互关系。结果：（1）行为学：中医治疗组较其它经造模各组在呼吸频率、体重增长、肺系数方面有明显改善，P＜0．05。（2）病理形态学：模型1组有轻到中度的肺泡炎，肺泡腔及肺间质内有一定数量的炎性细胞浸润，毛细血管充血，有点片状出血灶，间质大量成纤维细胞增生、胶原纤维沉积，呈中至重度肺纤维化改变，部分肺泡结构紊乱。模型2组炎症较模型1组减缓，P＜0．05，纤维化加重，P＜0．05。中医治疗组炎症最轻，分别与其它经造模各组比较，P＜0．05；纤维化与模型1组比较无明显差异，P＞0．0 5，与模型2组比较，有明显改善，P＜0．05。西药治疗组在炎症、纤维程度、灰度分区方面与模型2组均无区别。（3）coll-1、FN免疫组化结果：经造模的各组小鼠肺间质内可见coll-Ⅰ呈局灶性、斑片状、条索状分布，较假手术组明显增多，均为P＜0．01；模型2组比模型1组沉积更多，P＜0．05；中医治疗组与模型1组比较无明显变化，P＞0．0 5；西药治疗组与模型2组比较，无明显改善，P＞0．0 5；中医治疗组较模型2组明显改善，P＜0．05。假手术组小鼠肺组织中FN主要分布于血管、支气管周围、肺泡间隔以及肺泡囊开口处，呈细纤维状。中医治疗组与假手术组相似，模型1组、模型2组、西药治疗组在间质细胞呈阳性表达，沉积的ECM中FN亦呈阳性着色，呈不规则点、线状，分布较稀疏，模型1组、模型2组、西药治疗组两两比较，无显著差异，为P＞0．05；三者分别与假手术组、中医治疗组比较，均为P＜0．01。（4）肺间质中整合素α5β1免疫组化定量检测：假手术组与中医治疗组比较，P＜0．05，有显著差异；与其它各组比较差异更显著，均为P＜0．01。模型2组较模型1组减轻，P＜0．05；中医治疗组较模型1组、模型2组、西药治疗组均轻，P＜0．05。（5）肺间质中TGFβ1表达的免疫组化定量检测：假手术组与中医治疗组比较，P＜0．05，有显著差异；与其它各组比较，均为P＜0．01；模型1组较模型2组减弱，P＜0．05；中医治疗组较模型1组、模型2组、西药治疗组减弱，P＜0．05。（6）各组小鼠肺间质中bcl-2积分光密度：假手术组与中医治疗组有差别，P＜0．05，与其余各组比较均为P＜0．01。模型2组较模型1组增强，P＜0．05，与西药治疗组相似，P＞0．05。中医治疗组较模型1组、模型2组、西药治疗组均减弱，均为P＜0．01。各组小鼠肺间质中bax积分光密度：中医治疗组分别与模型1组、模型2组、西药治疗组比较，均为P＜0．05。（7）肺间质中coll-1、FN与整合素α5β1、TGF-β1、bcl-2、bax的相互关系：coll-1、FN分别与α5β1、TGF-β1、bcl-2在模型1组、模型2组、西药治疗组组内均呈正线性关系，与bax呈负线性关系。在中医治疗组组内coll-1、FN与整合素α5β1、TGF-β1、bcl-2、bax无线性关系。结论：通过系统理论探讨和实验研究表明：（1）ECM作为细胞生存的微环境，其变化并非仅仅是被动的、各种刺激因素作用的结果，它通过整合素的介导也能影响细胞的功能，在IPF纤维化期疾病仍呈进行性发展中扮演了一个重要的角色。其引起的病理变化与络病高度一致，是络病的现代生物学基础之一。（2）益气通络解毒汤能有效抑制博莱霉素诱导的小鼠特发性肺纤维化纤维化期进行性发展，其机理可能是阻断了沉积的ECM与整合素之间的相互促进关系。其治疗结果与恢复络脉之“运行和渗灌气血、运毒排毒、沟通上下内外功能”高度一致，故阻断沉积的ECM与整合素的相互促进作用是益气通络通络法的现代生物学内涵之一。