补肾生精法联合富血小板血浆干预兔骨缺损模型研究

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:a11564877
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目的:本研究旨在兔骨缺损模型中,以中医补肾生精法联合富血小板血浆、单纯中医补肾生精法和单纯富血小板血浆这三种方法进行干预。通过观察各组骨愈合相关生长因子信使RNA水平,骨愈合过程中骨钙素水平和骨组织观察对各组愈合情况进行对比,探究三种方法促骨愈合的作用机制。方法:选用24只普通级雄性新西兰大白兔,分为四组即:补肾生精法联合富血小板血浆组,纯补肾生精组、纯富血小板血浆组、空白组。每组随机分配兔6只。以手术方式造成兔左侧腓骨5mm缺失,建立骨缺损模型。兔耳中央动脉抽取全血5ml,两次离心法制备富血小板血浆得0.8ml,再以氯化钙,凝血酶联合制备富血小板血浆凝胶。在造模术后将凝胶注入骨缺损部位。补肾生精中药在造模术后第二日开始以汤剂每日定时灌胃两次,直至最后处死。造模术后第10,20,30日抽取兔耳中央动脉血,通过酶联免疫吸附试验测定血清骨钙素含量。兔处死后取肝、肾和新生骨组织,通过实时荧光定量PCR检测BMP-2、TGF-β1的信使RNA含量水平。通过HE染色观察新生骨组织形态。结果:血清骨钙素Elisa检测结果显示,联合组兔子在骨折愈合各个时间段中成骨活动活跃度都较其他组兔子高(P<0.05)。对肾与骨组织BMP-2和TGF-β1信使RNA的荧光定量PCR检测结果显示,使用了中医治疗的兔子肾与骨组织中BMP-2和TGF-β1信使RNA含量高于未使用中医治疗组的兔子(P<0.05)。结论:在兔腓骨缺损愈合过程中,使用中医补肾生精法联合富血小板血浆治疗能更好促进骨愈合,加快骨愈合速度,提高骨愈合质量。中医补肾生精法在治疗兔骨缺损过程中,能够提高肾及骨组织B M P-2与TG F-β1的m R N A的合成水平,这是中医补肾生精法促进骨折愈合的机制之一,显示出中医补肾生精法治疗骨折的良好疗效。
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