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目的:随着睡眠医学的研究进展阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome, OSAHS)作为呼吸、睡眠医学的交叉边缘学科,引起了人们的广泛关注,越来越多的学者认识到OSAHS不仅对成人患者可以带来一系列并发症,而且对儿童患者的智力和生长发育等也会带来不容忽视的负面影响。本研究通过检测红细胞补体受体1(complement receptor type1, CR1)的表达水平,旨在了解OSAHS对儿童的红细胞免疫功能的影响,探讨儿童OSAHS患者红细胞免疫功能的变化及临床意义。方法:选择2011年1月~2011年10月本院耳鼻咽喉科就医患儿30例,经多导睡眠监测(polysomnography, PSG)证实符合OSAHS的诊断。另选择同龄健康儿童30例作为对照,均为来本院健康查体的儿童,无睡眠打鼾及呼吸障碍病史,查体无扁桃体及腺样体肥大、小下颌等体征。所有研究对象均除外免疫系统疾病及过敏性疾病史,近期(1个月内)没有上呼吸道感染史。两组儿童的年龄、性别、体重指数(body mass index, BMI)等一般特征无显著性差异(P>0.05)。红细胞CR1数量检测采用细胞酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)对CRl的含量进行测定,按照郭峰等建立的细胞酶免疫分析法,检测时CR1抗体预包被在微孔板上,加入标准品和待测标本,每孔100μl,设立空白对照,37℃孵育2小时,然后加生物素化的CR1抗体,37℃孵育1小时,将未结合的生物素化抗体洗掉,然后加辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)标记的亲和素,37℃水浴箱孵育30min,用洗涤液洗板5次,加底物显色,37℃避光5min,硫酸终止反应后,以空白对照调零,用酶标仪测定450nm吸光度。以试剂盒所示的标准品绘制标准曲线,与标准曲线相比得到对应浓度,再乘以相应的稀释倍数,即得出样品的实际浓度。红细胞CRl活性检测采用红细胞C3b受体花环(erythrocyte C3b receptor rosett, ECRR)试验和红细胞免疫复合物花环(erythrocyte immune complex rosette, EICR)试验。按照郭峰法两组血液样本肝素抗凝,并于2h内以1000转/分离心5分钟,用PBS洗涤4次,按红细胞计数方法配成1.25×107/ml的使用液。检测时待测红细胞使用液100ul,分别加入补体致敏酵母多糖工作液100ul,酵母多糖试液100ul,都摇匀放37℃水浴30min,取出摇匀,加生理盐水100ul,混匀后再加0.25%戊二醛50ul,轻轻混匀,取1/3量水平涂片,吹干,加甲醇固定,加少许瑞氏液,染色10秒钟,自来水少许冲洗。高倍显微镜计数,一个红细胞上2个或2个以上酵母菌为一朵花环。计数200个红细胞,算出百分率。运用SPSS16.0软件对相关数据进行统计学处理及分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果:红细胞CR1数量检查结果显示,OSAHS患儿CR1数量及A值均低于对照组(P<0.05),且CR1数量与呼吸暂停低通气指数(apnea hypopnea index, AHI)呈负相关(r=-0.61,P<0.05);与最低血氧饱和度(lowest arterial oxygen saturation, LSaO2)呈正相关(r=0.53,P<0.05)。红细胞CR1活性检测结果显示,OSAHS患儿红细胞C3b受体花环结合率明显低于对照组(P<0.05),而红细胞免疫复合物花环结合率明显高于对照组(P<0.05),提示OSAHS患儿存在继发性红细胞免疫功能低下。结论:阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征影响儿童红细胞免疫功能,使红细胞免疫功能下降,且与病情的严重程度有关。其红细胞免疫功能的降低,可能会对整个免疫系统的功能带来不良影响。