胎盘来源3D球体间充质干细胞对大鼠脑缺血/再灌注损伤过程中炎性细胞因子的影响

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目的:观察胎盘来源3D球体间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织肿瘤坏死因子(TNF-ɑ)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)的影响。探讨MSCs对大鼠脑缺血后神经功能的可能性保护机制。为胎盘来源3D球体MSCs应用于脑缺血损伤治疗提供理论依据。方法:实验使用动物被随机分为假手术组、溶剂对照组、间充质干细胞(MSCs)治疗组。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,缺血2h后拔除鱼线进行再灌注,神经功能评分选择模型,应用荧光显微镜观察海马区标记MSCs分布,各组大鼠分别于干预处理后第1、3和7天(1d、3d、7d)进行神经功能评分后断头取脑,尼氏染色方法观察缺血区神经元形态变化,运用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法和RT-PCR检测大鼠脑组织中TNF-ɑ、IL-6和IL-10表达量变化。结果:标记的MSCs在海马区有表达;与对照组相比,治疗组大鼠7d神经运动功能有明显改善(F=29.996,t=2.236,n=6,p<0.05),尼氏染色缺血区神经元数量增多,形态较完整。ELISA测各时间点MSCs组大鼠脑组织中TNF-ɑ和IL-6蛋白含量显著降低(F=112.525~362.381,t=8.053~22.268,P<0.01),而脑组织IL-10蛋白表达含量显著升高(F=289.593~976.587,t=10.740~28.449,P<0.01)。RT-PCR结果:各时间点MSCs组大鼠脑组织中TNF-ɑ和IL-6m RNA表达量显著低于对照组(F=116.502~466.271,t=7.208~23.168,P<0.01),而脑组织IL-10 m RNA表达量显高于对照组(F=80.492~582.995,t=7.811~16.912,P<0.01)。结论:MSCs对大鼠脑缺血再灌注有神经保护作用,其作用机制可能与下调脑组织中TNF-ɑ、IL-6含量,上调IL-10含量有关。
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