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目的乳腺癌治疗后的复发转移是导致患者死亡的主要原因,血管形成在瘤细胞转移过程中发挥重要作用。雷帕霉素不敏感蛋白复合体(mammalian target of rapamycin complex 2,m TORC2)是由m TOR,m LST8,m Sin1,Protor及Rictor(rapamycin insensitive companion of m TOR)5种蛋白形成的激酶复合体,参与调节机体内细胞的新陈代谢、生长、增殖、凋亡及癌组织内血管形成过程,对乳腺癌细胞的生长增殖及远处转移具有重要影响。Rictor是m TORC2的骨架蛋白,对其稳定性至关重要,是m TORC2正常发挥生物学功能的必要条件。Rictor蛋白在包括乳腺癌在内的多种癌组织中均呈高表达,且高表达患者复发转移率高,预后差。目前Rictor影响预后的体内调节机制研究尚少。本研究旨在分析Rictor在乳腺癌组织中的表达情况,探讨其与各临床病理指标及预后的关系;初步探讨Rictor调节血管形成的可能分子机制,为乳腺癌的治疗提供新的思路及理论依据。方法随机选取天津市肿瘤医院2008年11月至2009年4月期间收治的乳腺浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)患者70例。通过免疫组化染色方法检测癌组织切片中Rictor、VEGF及血管形成标志物CD34的表达量;运用统计学方法分析Rictor蛋白表达水平与各临床病理参数及预后的关联,P<0.05有统计学意义。RNA干扰技术建立稳定降表达Rictor乳腺癌细胞系,通过Western Blotting检测降表达组及各对照组中Rictor、VEGF及CD31表达情况;通过Elisa检测各组细胞系细胞培养液中VEGF、MMP-9含量,分析其可能存在的分子机制。结果1.Rictor在乳腺浸润性导管癌组织中的表达情况Rictor蛋白免疫组化结果显示,本课题组70例乳腺癌患者中,Rictor阳性55例(78.6%);阴性(-)、低表达(+)、中度表达(++)和高表达(+++)率分别为21.4%、10.0%、28.6%、40.0%。2.Rictor在乳腺浸润性导管癌组织中的表达水平及其与各临床病理指标的关系分析结果显示:Rictor的表达与原发肿物大小(P=3.7×10-4)、腋窝淋巴结(P=0.022)、临床分期(P=0.005)、VEGF(P=2.0×10-6)、CD34(P=6.1×10-7)相关。其中,Rictor与VEGF和CD34的相关系数分别为0.535和0.510。3.Rictor在乳腺浸润性导管癌组织中的表达水平与患者预后的关系单因素分析结果显示:肿瘤大小、腋窝淋巴结转移数目、Rictor及VEGF表达情况是患者DFS及OS的影响因素。Cox回归多因素分析表明,Rictor表达水平与患者预后无统计学意义。4.稳定降表达Rictor组乳腺癌细胞与对照组相比,VEGF及CD31蛋白表达量显著减少;相同培养条件下,胞外分泌VEGF、MMP-9量明显降低。结论1.Rictor蛋白阳性患者腋窝淋巴结转移率高,腋窝淋巴结阳性患者癌细胞内Rictor强阳性率高,表明Rictor与腋窝淋巴结转移相关,提示Rictor很可能参与乳腺癌细胞体内转移过程;2.Rictor蛋白表达水平能有效影响患者预后,提示该蛋白可能是乳腺癌的不良预后因素。然而,Cox回归多因素分析结果并不支持Rictor为独立影响因素。因此,Rictor能否成为真实可靠的预后指标,尚需更多临床数据进一步证实;3.稳定降表达Rictor的乳腺癌细胞合成VEGF及CD31减少,胞外分泌VEGF、MMP-9量减低。提示Rictor可能通过体内相应分子学机制影响VEGF、CD31及MMP-9的合成及分泌,进而调控肿瘤组织内血管形成,影响体内癌细胞远处转移。