山竹黄酮和金属离子、血清白蛋白及DNA的相互作用研究

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山竹黄酮具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗癌以及抗艾滋病毒等生理药理活性,近年来引起越来越广泛的关注。本文主要以α-山竹黄酮(α-MAG)和γ-山竹黄酮(γ-MAG)作为研究对象,进行了以下几个方面的研究:首先,利用紫外吸收光谱法研究α-MAG和γ-MAG与几种金属离子(Mg2+、Al3+和Fe3+等)形成配合物前后其紫外吸收光谱的变化,并应用摩尔比法确定配合物的配位比,进一步计算出配合物的稳定常数和摩尔吸收系数。结果表明,α-MAG与Al3+、Fe3+反应后紫外吸收光谱发生明显变化,最大吸收波长均发生红移,且与Al3+、Fe3+形成的配合物的化学计量配位比([M]/[L])分别为1:1和1:2,稳定常数分别为2.857×106。和1.527×109。γ-MAG与Mg2+、Al3+和Fe3+等金属离子反应后紫外吸收光谱发生明显变化,最大吸收波长均发生位移,且与Mg2+、Al3+、Fe3+和Cu2+形成的配合物的化学计量配位比([M]/[L])分别为1:2、1:l、1:1和1:2,稳定常数分别为1.200×109、2.227×106、2.251×106和2.311×109.其次,采用荧光光谱法研究了α-MAG与牛血清白蛋白(BSA)和正常人血清白蛋白(HSA)的相互作用。结果表明,α-MAG对BSA有较强的荧光猝灭作用,其荧光猝灭机理属于动态猝灭;不同温度下α-MAG与BSA的结合常数分别为1.309×105(289 K)和6.776×1044(300 K),二者存在一个结合位点;依据福斯特(FSrster)能量转移原理求得其结合距离r=1.70 am;由热力学参数确定它们之间的作用力主要是氢键和范德华力。α-MAG对HSA的荧光猝灭主要以静态猝灭为主;不同温度下α-MAG与HSA的结合常数分别为3.327×104(298 K)和1.349×104(308 K),二者存在一个结合位点;依据福斯特(F(?)rster)能量转移原理求得其结合距离r=1.82 nm;由热力学参数确定它们之间的作用力主要是疏水作用力。最后,在pH=7.4的三羟甲基胺基甲烷-盐酸(Tris-HCl)的缓冲溶液中,利用荧光光谱法和紫外吸收光谱法研究了γ-MAG和脱氧核糖核酸(DNA)的相互作用,并用粘度法加以验证。结果表明,DNA的存在使得γ-MAG的荧光强度增强,DNA以部分插入方式(非经典插入方式)与γ-MAG发生作用,且离子强度对二者的作用有比较明显的影响。
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