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第一部分胎盘免疫调节因子的分离纯化及活性检测目的纯化胎盘免疫调节因子(placenta factor PF)和筛选活性最显著的组分。方法将新鲜人胎盘去筋膜,生理盐水冲净、剪碎匀浆,反复冻融后,透析,取透析外液冻干,上样于Sephadex G-25凝胶层析柱,洗脱,收集各组份。通过培养淋巴细胞,用MTT法鉴定PF纯化产物的活性,反相高效液相色谱分析纯产物的纯度,基质辅助激光解吸附电离串行飞行时间质谱测定产物的分子量。结果PF经Sephadex G-25凝胶柱纯化后,得到的第四峰具有明显促进淋巴细胞增殖活性,是胎盘免疫调节因子的主要活性成分,是分子量为6737.813Da的多肽,其纯度为82%,结论胎盘免疫调节因子经Sephadex G-25凝胶柱纯化得到的第四峰是胎盘免疫调节因子的主要活性成分,其纯度为82%,分子量为6737.813Da。第二部分胎盘免疫调节因子对PC12细胞生长的影响目的:观察胎盘免疫调节因子(placenta factor PF)对PC12细胞生长的影响。方法:培养PC12细胞,用MTT法观察PF对体外无血清培养PC12细胞存活率的影响及PF对低血清培养PC12细胞增殖的影响,普通光学显微镜观察PC12细胞形态的变化。结果:对无血清培养的PC12细胞加入不同浓度的PF培养44小时后, PF在浓度为50μg/ml、25μg/ml、12.5μg/ml和6.25μg/ml时可以显著提高无血清培养PC12细胞的存活率(P<0.05)。对低血清培养的PC12细胞加入不同浓度的PF培养68小时后, PF在浓度为12.5μg/ml和6.25μg/ml时可以显著提高PC12细胞的数量(P<0.01)。对低血清培养的PC12细胞加入不同浓度的PF培养10天, PF在浓度为3.13μg/ml和1.56μg/ml作用第6天时,细胞长出突起。结论:PF能提高无血清培养PC12细胞的存活率,促进PC12细胞增殖,诱导PC12细胞分化。第三部分PF纯化第四峰(PFIV)对PC12细胞生长的影响目的:观察胎盘免疫调节因子纯化第四峰(PFIV)对PC12细胞生长的影响。方法:培养PC12细胞,用MTT法观察PFIV对体外无血清培养PC12细胞存活率的影响及PFIV对低血清培养PC12细胞增殖的影响,普通光学显微镜观察PC12细胞形态的变化。结果:对无血清培养的PC12细胞加入不同浓度的PFIV培养44小时后,在浓度为15μg/ml、7.5μg/ml、3.75μg/ml和1.88μg/ml时可以显著提高无血清培养的PC12细胞的存活率(P<0.05)。对低血清培养的PC12细胞加入不同浓度的PFIV培养68小时后,在浓度为0.47μg/ml和0.235μg/ml时可以显著提高PC12细胞的数量(P<0.01)。对低血清培养的PC12细胞加入不同浓度的PFIV培养10天, PFIV在浓度为0.118μg/ml和0.059μg/ml作用第6天时,细胞长出突起。结论:胎盘免疫调节因子第四峰(PFIV)能提高无血清培养PC12细胞的存活率,促进PC12细胞增殖,诱导PC12细胞分化。