高原环境对大鼠桡骨骨折愈合过程中TGF-β1表达和相关生化特点的影响

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目的 通过研究在高原地区骨折愈合过程中TGF-β1(转化生长因子-β1)的表达以及血清骨钙素水平、AKP(碱性磷酸酶)活性、钙磷含量变化及其对骨折愈合的影响,明确TGF-β1在高原地区骨折愈合中的地位及作用,为进一步研究高原地区骨折愈合以及骨折延迟愈合、骨不连的发生机理及防治提供实验依据。 方法 1、建立高原大鼠单侧桡骨中段骨折模型。2、组织学观察骨折愈合情况。3、免疫组化法检测TGF-β1的表达 。4、用RIA(radioimmunoassay,放射免疫测定)检测血清骨钙素含量。5、全自动生化分析仪检测血清AKP活性及血钙、磷含量。 结果 1、组织学观察结果显示:在大鼠骨折愈合过程中,高原组整个骨形成过程与平原组基本一致,但在成骨细胞及软骨细胞的增殖分化,以及软骨内成骨或膜内成骨发生的时间上较平原组有所推迟。尤以骨折中期(2~4周)明显。2、免疫组化染色法显示:高原和平原水平的大鼠在骨折愈合过程中TGF-β1的表达变化趋势基本一致,均在骨折早期即开始表达,并于2~4周达到较高水平,到第6周末恢复正常水平。但高原组大鼠TGF-β1的表达量较低,其AOD(average optical density,平均光密度)值明显低于平原组,尤以3天组(由0.5392±0.0379降至 0.4298±0.033 P<0.01)和3周组(由0.5392±0.0379降至0.4298±0.033 P<0.01)相差非常显著。 3、骨钙素含量检测显示,与平原组相比,高原组骨折愈合早期血清骨钙素含量上升速度较慢,到第2周末才有显著增加,到第3周末达到峰值,但其峰值显著低于平原组同时限点骨钙素含量(由3.23±0.16降至1.76±0.40ng/ml P<0.01)。4、AKP活性检测显示:高原组血清AKP活性增<WP=9>加滞后于平原组,仅在第2周时有较明显的增加,于第三周末达到峰值,且其峰值较平原组有显著差异(由513±69降至 380±42IU/L P<0.05)。5、血钙磷含量检测及钙磷乘积显示:较平原组而言,高原组血钙浓度上升滞后,血钙磷含量较平原组略低,但无显著差异。但高原组动物血钙磷乘积的升高较平原组要慢,且在高峰期维持时间较平原组短。结论 1.高原组大鼠桡骨骨折愈合的过程中,成骨细胞、软骨细胞等的增殖分化,以及软骨内成骨或膜内成骨的发生均较平原组延迟。2.高原组大鼠桡骨骨折愈合过程中,TGF-β1的表达量,血清骨钙素水平,AKP活性以及血钙磷含量均较平原地区低。3.高原组大鼠桡骨骨折愈合过程中TGF-β1具有重要作用,尤其对细胞的分化、增殖起重要的调节作用。4.高原地区骨折愈合较平原地区延迟,可能与骨折愈合过程中骨细胞、成骨细胞、破骨细胞等生物学作用有所下降有关。
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