大肠杆菌（Escherichia coli）作为食源性粪源污染的卫生学指标及水体卫生学检测的微生物指标,对公共医疗、食品安全、经济发展等领域带来了巨大隐患,因此水体和食品中大肠杆菌的快速定量检测对于控制传染病、保护环境卫生和人民群众身体健康都有着重要的意义。目前滤膜法等传统大肠杆菌检测方法存在检测周期长、检测效率低等缺点,而新型检测技术如免疫法等由于其各自的不足也无法满足现场检测需求,电化学生物传感器因其灵敏度高、耗时短等特性成为常用的检测传感器,适用于大肠杆菌的现场快速检测。本文设定了电流指标i0和电量指标A两项电化学响应指标,用计时电流法记录检测样品中大肠杆菌对i0和A的累积影响,并确定了i0、A和细菌浓度之间的关系。该方法的检测范围为104～108 CFU/mL,检测结果与实际结果的误差小于30%,包括细菌胞内溶出物和完整细胞结构在内的死亡细菌对检测结果无影响,但无法排除复杂环境中带电杂质的干扰。在扫描电子显微镜和荧光显微镜下观察吸附在电极表面的大肠杆菌细胞,并分析检测前后电解液中细菌浓度的变化,完善了大肠杆菌通过吸附阻碍电极表面电子传递从而导致电化学信号改变的原理。分析了金黄色葡萄球菌与大肠杆菌在电化学响应和吸附效率方面的差异,验证了电化学检测原理的准确性。本研究开发了一种基于计时电流法的电化学检测方法,仅使用未经修饰的玻碳电极便可实现快速定量检测大肠杆菌,为今后电化学生物传感器的发展提供了新的方向思路和理论依据。