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目的：构建真核表达载体pcDNA3.1-PDGF-GAL；观察重组质粒瞬时转染Neuro-2a细胞后甘丙肽基因（galanin,GAL）的表达水平;建立稳定表达小鼠GAL的Neuro-2a细胞系GAL-Neuro-2a；探讨内源性过表达的甘丙肽蛋白对Neuro-2a细胞增殖及细胞周期的影响。 方法：采用PCR方法，以重组质粒pUC18-PDGF-GAL为模板,扩增PDGF-GAL基因序列,最终定向克隆入载体pcDNA3.1并替换该载体原有的CMV启动子与增强子序列,从而构建具有神经细胞特异性的表达载体pcDNA-PDGF-GAL；采用脂质体法将重组质粒瞬时转染小鼠Neuro-2a细胞,分别在转染后24h,48h,72h收集细胞及细胞培养物，采用RT-PCR和ELISA方法,鉴定GAL基因在神经细胞中的表达情况；重组质粒pcDNA3.1-PDGF-GAL脂质体法转染Neuro-2a细胞后48h，通过G418筛选获得稳定过表达GAL的细胞克隆；利用RT-PCR和Westernblot法检测单克隆细胞中GAL在Neuro-2a细胞的过表达水平，另外通过MTT法检测Neuro-2a细胞的增殖，并借助流式细胞仪分别对过表达GAL的单克隆细胞进行细胞周期和细胞凋亡的检测。 结果： 1.经PCR和DNA序列测定证实,目的片段PDGF-GAL已插入表达载体；RT-PCR和ELISA证明,重组质粒pcDNA3.1-PDGF-GAL经脂质体瞬时转染法实现了GAL基因在Neuro-2a细胞的过表达。 2.获得稳定转染Neuro-2a细胞即GAL-Neuro-2a实现并证明GAL基因的高表达，MTT法绘制细胞生长曲线实验显示转染重组质粒pcDNA3.1-PDGF-GAL的Neuro-2a细胞增殖速度显著低于对照组（P<0.05）,相比对照组未转染正常细胞，内源性过表达的GAL能使Neuro-2a细胞周期阻滞在G0/G1期而且对Neuro-2a细胞凋亡有明显的促进作用。 结论： 1.成功构建pcDNA3.1-PDGF-GAL,实现GAL基因在Neuro-2a细胞过表达，从而为制作过表达GAL的转基因小鼠及进一步研究GAL在神经系统的生物学功能提供重要理论依据。 2.真核表达载体pcDNA3.1-PDGF-GAL在转染Neuro-2a细胞中可高表达甘丙肽蛋白，并对Neuro-2a细胞的增殖和凋亡均有显著影响，为进一步研究GAL的生物学作用奠定了重要基础。