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目的:以瓜蒌子制备瓜蒌子油,以制备瓜蒌子油后所剩油饼制备瓜蒌子水提液。按瓜蒌子所含油-水比例,基于瓜蒌子自身油-水两相制备瓜蒌子口服乳剂(简称乳剂),并建立质量标准。通过网络药理学-分子对接技术研究乳剂中油类成分的降血糖机制并采用四氧嘧啶制备小鼠血糖模型,研究乳剂降血糖效果。方法:1)瓜蒌子油的制备在单因素试验的基础上,对瓜蒌子油提取率、亚麻酸及亚油酸含量进行数据标准化处理计算综合评分,以瓜蒌子油提取率、综合评分为评价指标(鉴于瓜蒌子油在乳剂制备中的重要性,本文在瓜蒌子油制备中将瓜蒌子油提取率与综合评分分别作为评价指标进行考察),采用Box-Behnken设计对瓜蒌子油超声提取工艺中的超声时间、超声温度、料液比3因素的最优化组合进行研究,建立并分析各因素与瓜蒌子油提取率及综合评分的数学模型,并采用瓜蒌子油提取率和指纹图谱相似度进行验证。2)瓜蒌子水提液的制备采用紫外-可见分光光度法测定总氨基酸的吸光度及总核苷的吸光度,并在单因素试验的基础上,以总氨基酸吸光度及总核苷吸光度为评价指标,采用Box-Behnken响应面法对水提液提取温度、提取时间和料液比3因素的最佳总氨基酸及总核苷提取工艺进行考察。3)瓜蒌子口服乳剂的制备采用超声搅拌法将处方量瓜蒌子油(油相)、瓜蒌子水提液(水相)配以乳化剂制备成口服乳剂,并在单因素试验的基础上,以离心稳定性常数(Ke值)为评价指标,采用Box-Behnken响应面法对搅拌速度、搅拌时间和乳化温度3因素的最佳瓜蒌子口服乳剂制备工艺进行考察。4)瓜蒌子口服乳剂的质量标准按《中国药典》(2020年版)要求描述外观,采用茚三酮显色法鉴别瓜蒌子口服乳剂中氨基酸类成分,建立瓜蒌子口服乳剂中不饱和脂肪酸类成分和核苷类成分HPLC指纹图谱并测定不饱和脂肪酸类成分和11种核苷类成分的含量。5)瓜蒌子油降糖机制研究查阅相关文献记录瓜蒌子油中不饱和脂肪酸的化学成分。运用Gen CLip3数据库,以“Type 2 diabetes mellitus”(2型糖尿病)为关键词收集2型糖尿病疾病的靶点蛋白。用DAVID数据库将筛选所得化学成分与疾病的共有靶点蛋白,进行的KEGG通路及GO功能富集分析。蛋白相互作用网络分析(protein protein interaction,PPI)通过STRING11.0软件进行绘制得到。通过Gephi0.9.2软件构建关于筛选所得的化合物、疾病蛋白靶点和生物学功能活性的成分-蛋白靶点-信号通路网络。靶点蛋白和化学成分的分子对接分析通过SYBYL-X2.1.1对接软件进行。6)瓜蒌子口服乳剂降血糖作用的药效学初步研究将小鼠分为空白组(蒸馏水,30m L·kg-1)、模型组(蒸馏水,30m L·kg-1)、二甲双胍组(蒸馏水,0.06mg·g-1)、瓜蒌子口服乳剂低、高剂量组(10、20m L·kg-1),连续灌胃给药14天,在给药前和给药7d、14d后,空腹8h后,称重并进行尾部点刺取血测定小鼠的血糖值。末次给药后进行糖耐量实验,50%葡萄糖溶液2g·kg-1剂量给予各实验组灌胃;末次给药后测得血糖值作为0min时血糖值;并于灌胃后30、60、120min分别测量血糖值。验证瓜蒌子口服乳剂降血糖作用。结果:1)瓜蒌子油的最佳提取工艺:超声时间30min、超声温度50℃、料液比1:12(g·m L-1)。经试验验证,在此条件下,瓜蒌子油提取率为45.90%,与理论计算值45.85%基本一致;瓜蒌子油与瓜蒌子油对照品共有峰匹配图谱相似度为0.98。2)瓜蒌子水提液的最佳提取工艺:提取温度70℃、提取时间30min、料液比1:12(g·m L-1)。验证结果表明,最佳提取工艺的总氨基酸吸光度为0.479,与预测值0.482基本一致;最佳提取工艺的总核苷吸光度为0.537,与预测值0.544基本一致。最佳提取工艺条件下总氨基酸提取率为11.90mg·g-1,总核苷提取率为2.29mg·g-1。3)瓜蒌子口服乳剂的最佳制备工艺:搅拌速度300r·min-1,搅拌时间30min,乳化温度40℃;在该条件下,制得的乳剂呈乳白色且稳定均一,实际制得乳剂的平均Ke值为3.46%,RSD值为2.39%(n=5),实际乳剂测得Ke值与预测值之间偏差均小于5%。4)质量标准:为乳白色均一液体,流动性好。乳剂加入茚三酮溶液加热后显紫色;乳剂中不饱和脂肪酸类成分和核苷类成分HPLC指纹图谱相似度分别为0.995、0.989。乳剂中亚麻酸、亚油酸的含量分别为162.08μg·m L-1,RSD=0.6%(n=3);44982.58μg·m L-1,RSD=1.2%(n=3)。11种核苷含量分别为胞嘧啶0.65μg·m L-1,RSD=1.79%(n=3);腺嘌呤4.67μg·m L-1,RSD=1.31%(n=3);尿嘧啶1.15μg·m L-1,RSD=1.46%(n=3);次黄嘌呤1.27μg·m L-1,RSD=2.36%(n=3);黄嘌呤1.31μg·m L-1,RSD=1.53%(n=3);腺苷22.73μg·m L-1,RSD=1.31%(n=3);脱氧腺苷1.41μg·m L-1,RSD=3.09%(n=3);鸟苷30.09μg·m L-1,RSD=1.21%(n=3);脱氧鸟苷0.74μg·m L-1,RSD=2.70%(n=3);肌苷5.23μg·m L-1,RSD=2.04%(n=3);胸苷2.14μg·m L-1,RSD=1.89%(n=3)。5)网络药理学研究结果:瓜蒌子油不饱和脂肪酸中的DHA、EPA等成分主要与IL6、MAPK3、PPARG等靶点蛋白通过PPAR signaling pathway、Insulin resistance等信号通路协同发挥降血糖作用。6)药效学研究结果:在实验终期空白组、二甲双胍组、乳剂低剂量组及乳剂高剂量组小鼠体重较实验初期有明显增长,而模型组小鼠体重未见增长。给药14d后,二甲双胍组及瓜蒌子口服乳剂低剂量组与模型组有统计学意义(P<0.05),乳剂有一定的降血糖作用,给药后糖尿病小鼠糖耐量较模型组好。结论:1)瓜蒌子油及瓜蒌子水提液的提取工艺方法简便、可靠,可用于瓜蒌子油及瓜蒌子水提液的制备。2)瓜蒌子口服乳剂的处方及制备工艺较为合理,制订的瓜蒌子口服乳剂质量标准能对该制剂进行质量控制。3)基于网络药理学研究瓜蒌子油不饱和脂肪酸中的DHA、EPA等成分可作用IL6、MAPK3、PPARG等靶点蛋白通过PPAR signaling pathway、Insulin resistance等信号通路协同发挥降血糖作用,并通过试验验证乳剂有一定的降血糖作用。