几种新型苹果矮化砧木的组培快繁技术研究

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苹果矮化密植栽培是世界苹果产业的发展方向,使用矮化砧木是实现矮化密植栽培的主要途径之一。与矮化中间砧相比,自根砧具有整齐度高、结果早、产量高、品质好等诸多优点。培育矮砧自根苗主要采用压条、扦插和组织培养等繁殖方法,与扦插和压条相比,组织培养具有节约育苗用地、繁殖系数高、繁殖周期短、不受季节限制、苗整齐度高等优点。本试验以河北农业大学苹果课题组选出的几个矮化砧木优系以及俄罗斯选育的71-3-150、60-160等10个苹果矮化砧木为试材,研究了不同植物生长调节剂配比对砧木组培苗的生长状态及相关生理生化指标的影响,建立了不同砧木茎尖培养快繁体系,为实现优良苹果矮化自根砧苗快速应用于生产提供保障,为苹果矮化砧木的快繁提供参考。主要研究结果如下:1.3月20日、6月10日和8月2日3个时期取材,以3月20日取一年生枝条,室内水培扦插,芽萌发后取大于1.5 cm的嫩梢接种,污染率最低(为10%)且成活率最高(为76.7%)。2.外植体用70%乙醇消毒30 s后,用0.1%Hg Cl2溶液消毒处理8 min,污染率较低(7.5%),成活率较高(77.5%)。对易褐化的BP砧木,经升汞灭菌后,冲洗时最后一次无菌水加入Vc 25 mg·L-1,浸泡20 min后接种可有效降低褐化率。3.适宜71-3-150、6号、111号等10个苹果矮化砧木启动培养的植物生长调节剂配比为6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1。适宜各砧木增殖和生根培养的植物生长调节剂配比分别为:71-3-150、60-160继代培养基为6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.05mg·L-1,生根培养基为IAA 1.0 mg·L-1+IBA 0.6 mg·L-1;111号继代培养基为6-BA 0.5mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+PVA 1.5 g·L-1,生根培养基IBA 1.0 mg·L-1;6号继代培养基为BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.05~0.1 mg·L-1,生根培养的上一代继代培养基为6-BA 1.0mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1;生根培养基为IAA 1.0 mg·L-1+IBA 0.4 mg·L-1;28号、9-3的继代培养基为BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,生根培养基为IAA 1.0 mg·L-1+IBA0.4 mg·L-1;1号、36号、3-45继代培养基为BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,生根培养基为1.0 mg·L-1 IBA。其中111号、1号、36号、3-45接种生根培养基后需要先暗培养7天后再转至光/暗周期12h/12h条件下培养。4.6号砧木组培继代苗,经浓度为500 mg·L-1 IBA浸泡15 min后扦插成活率较高,为33.3%。继代苗接种至生根培养基后,在培养室培养2~4 d,温室内炼苗9 d后,芽苗尚未长根,扦插的成活率达98%。5.不同植物生长调节剂处理组培苗的蛋白质含量差异不显著,叶绿素含量与叶片外观颜色较为一致,POD、SOD、CAT及PPO活性与组培苗生长状态有一定的相关性,组培苗的生长状态较好,POD、SOD、PPO活性较低,CAT活性较高,但不同处理组培苗的PAL活性变化则无明显规律性。6.111号组培苗在相同外源6-BA浓度(0.5、1.0、1.5 mg·L-1)下,内源ZR含量随着外源NAA在0.05~0.15 mg·L-1范围内的增加而降低;在同一NAA浓度(0.05、0.1、0.15 mg·L-1)下,ZR随着外源6-BA在0.5~1.5 mg·L-1浓度范围内增加呈先上升后降低的趋势。71-3-150组培苗在本试验所设6-BA浓度下,内源GA含量有随培养基中6-BA浓度升高而降低的趋势,外源植物生长调节剂对其它内源激素的影响未呈现明显的规律性。7.71-3-150的增殖系数与内源GA含量呈极显著负相关(r=-0.91),与GA/ZR比值显著负相关,与IAA/GA的比值显著正相关,而苗高与内源激素GA含量和GA/ZR比值显著正相关,与IAA/GA比值显著负相关。111号的增殖系数仅与内源ZR含量呈显著性正相关,与GA/ZR比值存在一定的负相关;苗高与所测激素含量及其比值的相关性均不显著。
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