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肝细胞癌是一种常见的原发性恶性肿瘤。乙型肝炎病毒是造成肝细胞癌发生的一个主要原因,但是以往的研究都是从间接的方式去阐述其致癌的机理,其致癌方式并没有被清楚地说明。我们从文献得知癌症干细胞作为一种癌组织产生的源头,能直接促进癌症的发生,因此我们想从癌症干细胞方面研究乙型肝炎病毒介导的肝细胞癌形成原因。为了研究肝癌细胞与普通肝细胞之间的区别,我们检测肝癌细胞系HepG2与正常肝细胞系L02的干细胞相关因子(Klf4、c-Myc、Nanog、Oct4和Sox2)的mRNA表达水平以及肝癌干细胞表面标志物(CD90、CD117和CD133)的表达水平。我们发现HepG2细胞系的干细胞相关因子的mRNA表达水平和肝癌干细胞表面标志物的表达水平都比L02细胞系高。这个发现告诉了我们肝细胞向肝癌细胞转化的过程与细胞的去分化和癌干细胞表面标志物表达紧密相关。紧接着我们对肝癌细胞系HepG2以及其转入乙型肝炎病毒基因组的细胞系HepG2.2.15进行研究,我们发现在HepG2.2.15细胞系的干细胞相关因子mRNA表达水平上明显比HepG2细胞系高,癌干细胞表面标志物的表达水平也显著比HepG2高。随后我们在细胞生长实验上发现HepG2.2.15细胞系的增殖能力和迁移能力比HepG2细胞系更强。以上的实验结果证实HepG2.2.15细胞系在乙型肝炎病毒基因组的影响下,其癌干细胞化的水平比HepG2细胞系高。在以往的文献报道当中,我们发现乙型肝炎病毒导致肝细胞癌的主要因素可能是病毒生命周期中产生的HBx蛋白和preS/S蛋白部分,我们在相关文献中也发现HBx、preS1和preS2与肝癌的发生发展可能相关。因此我们设计了一些实验检测相关蛋白HBx、preS1和preS2对于肝细胞转化成癌干细胞的能力。我们在肝细胞系L02细胞和肝癌细胞系HepG2细胞中分别稳定表达了 HBx、preS1和preS2基因。在我们检测各个构建好的细胞系的癌干细胞相关指标之前,我们惊奇地发现稳定表达preS1的L02细胞系的生长情况和细胞形态发生了巨大的改变,随后我们深入检测preS1相关细胞系的癌干细胞水平。我们发现了 preS1能强烈地促进相应细胞系的癌干细胞化,使其干细胞相关因子mRNA表达水平显著提高,癌干细胞标志物的表达水平也部分提高了。随后通过一系列细胞生长实验确定了 preS1基因能促进肝细胞系L02的自我更新和增殖能力,揭示乙肝病毒的PreS1蛋白是导致肝癌干细胞发生发展的重要因素。