目的1.在组织水平，研究转录因子FOXO3a在胶质瘤病例中的表达情况，结合预后指标p27^kip1和增殖指标Ki-67及临床相关资料，初步探讨FOXO3a与胶质瘤发生、发展的关系。2.在细胞水平，研究FOXO3a及p27^kip1在胶质瘤细胞增殖中的变化，初步探讨FOXO3a参与胶质瘤细胞生长调控的机制。方法1.在组织水平，选取70例不同病理分级的胶质瘤标本，其中Ⅱ级34例，包括弥漫性星形细胞瘤26例，原浆型星形细胞瘤1例，肥胖型星形细胞瘤2例，混合少枝-星形细胞瘤3例，室管膜瘤2例；Ⅲ级24例，包括间变性星形细胞瘤22例，间变性少枝-星形细胞瘤2例；Ⅳ级12例，包括多形性胶质母细胞瘤8例，室管膜母细胞瘤3例，髓母细胞瘤1例。采用免疫组化方法，检测FOXO3a、p27^kip1及增殖指标Ki-67的表达情况，SPSS13.0统计软件分析数据。2.在细胞水平，采用血清饥饿合并释放同步化处理胶质瘤细胞，流式细胞仪检测细胞周期，Western blot、免疫荧光及核浆分离技术检测FOXO3a、p27^kip1在细胞内的表达、亚细胞定位。应用LY294002作用胶质瘤细胞，流式细胞仪分析其对胶质瘤细胞周期的影响，Western blot、免疫荧光、核浆分离技术检测在细胞周期受抑制的情况下FOXO3a、p27^kip1的表达、亚细胞定位及功能的影响。结果1.免疫组化结果显示：在不同病理分级胶质瘤中，FOXO3a的表达有显著差异（P<0.001），随肿瘤恶性程度增高而降低。结合临床资料分析显示：FOXO3a阳性率与胶质瘤患者临床分期有相关性。患者临床分期越晚，其阳性率越低；与胶质瘤患者的性别、年龄、Karnofsky评分（KPS）、肿瘤发生部位、手术方式、肿瘤直径、血管密度及坏死无明显相关性。Spearman等级相关分析显示：FOXO3a与p27^kip1表达呈正相关（r=0.845; P<0.001）；FOXO3a与Ki-67表达呈负相关（r=-0.555; P<0.001）；p27^kip1与Ki-67的表达呈负相关（r=-0.647; P<0.001）。Kaplan-Meier分析显示：FOXO3a低表达（≤23.5%）的患者，其五年生存率明显低于高表达（>23.5%）的患者（P<0.001）；Cox比例风险模型多因素生存分析显示：FOXO3a的表达具有独立的预后意义（P<0.001）。2.血清饥饿合并释放能够刺激胶质瘤细胞增殖，FOXO3a表达下降，并从细胞核向细胞质转位，其转录调节p27^kip1表达下降。PI3K/Akt抑制剂LY294002能抑制胶质瘤细胞周期，磷酸化的FOXO3a表达下降，细胞中FOXO3a蛋白绝对含量增高，p27^kip1表达增高，并向细胞核集聚，抑制细胞进入S期。结论1.组织水平发现FOXO3a表达的异常与胶质瘤病例的恶性程度密切相关，并且FOXO3a与p27^kip1表达呈正相关而与Ki-67表达呈负相关，提示在胶质瘤中FOXO3a表达异常，导致细胞周期失控，促进细胞异常增殖，从而参与胶质瘤的发生、发展。因而，FOXO3a的表达可作为胶质瘤临床检测、诊断的指标之一。2.细胞水平发现FOXO3a转录影响P27kip1分子的表达，导致了细胞周期的阻滞，具有潜在的抑癌性。PI3K/Akt特异性的激酶抑制剂能靶向FOXO3a，恢复其转录活性，从而诱导细胞周期阻滞，最终抑制肿瘤生长。因而，FOXO3a有望成为胶质瘤的干预治疗或药物治疗的靶点。