目的：骨肉瘤是最常见的原发性恶性骨肿瘤，12—25岁发病率最高，临床治疗困难，单纯截肢者往往在一年内发生肺转移，对人类特别是青少年危害十分严重。在该病的治疗中，除了手术治疗，放疗和化疗之外，免疫治疗越来越受到人们的重视。单克隆抗体技术的发展促进了肿瘤表面标志物与其恶性表现之间关系的研究，更促进了免疫治疗的研究。为了寻找与骨肉瘤的恶性生物学行为相关的标志，本实验建立了一株分泌抗人成骨肉瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞系并对其抗体特性进行了研究。方法：利用我室自建的骨肉瘤细胞系（OS——9607）免疫Balb/c小鼠，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0进行融合，采用PEG促融合技术和有限稀释法，经筛选和克隆化后，间接ELISA法检测杂交瘤培养上清中有特异性抗体分泌后，建立杂交瘤细胞系。以免疫组织化学ABC法对其进行特异性鉴定，以琼脂糖凝胶双向扩散法检测抗体亚类，以Western-Blot等方法研究抗体特性。结果：共筛选出阳性克隆12孔，选择克隆生长好、特异性强的3孔细胞进行克隆化，培养出1株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系。其中3D9株杂交 第四旱医大毕硕士掌位论文瘤细胞经过100d连续培养，单克隆抗体分泌稳定、特异性强、效价高，经鉴定为 3D9为 IgG；，腹水效价为 1：1．28 X 10’，细胞培养上清效价为 1：32。兔疫组化检测结果发现，3D9相应抗原在成骨肉瘤组织及成骨肉瘤细胞系呈高度表达u3％人 和其它恶性骨肿瘤、呼吸、消化系统肿瘤有交叉反应，mAb3Dg染色以细胞核为主，与正常组织罕有阳性反应。WesternSlot方法研究结果发现，mAb3Dg相对应的肿瘤相关抗原为一小肽，相应分子量为 M 54 000。结论：得到的杂交瘤细胞系分泌的单克隆抗体具有成骨肉瘤细胞特异亲和性，可能成为新的成骨肉瘤生化标志，在肿瘤的免疫治疗方面有广阔的应用前景。为今后的临床和基础研究打下了一定的基础。