【摘 要】
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龋病是威胁人类健康人类三大非传染性疾病之一,其实质是细菌感染性疾病。目前防龋的研究主要集中在链球菌在牙面的粘附、聚集及增殖机理几个环节进行,针对这几个环节,人们在
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龋病是威胁人类健康人类三大非传染性疾病之一,其实质是细菌感染性疾病。目前防龋的研究主要集中在链球菌在牙面的粘附、聚集及增殖机理几个环节进行,针对这几个环节,人们在抗菌制剂,抗菌药物,抗菌植物,免疫防龋等方面做了大量的工作。但对致龋菌本身增殖过程中基因调控机理尚研究较少,细菌增殖过程中的防龋研究还不深入。本研究从远缘链球菌基因组中克隆到细胞分裂蛋白ftsK基因序列,在大肠杆菌中进行了表达与纯化,并制备了抗体;然后使ftsK在远缘链球菌中过表达,观察对其生长的影响;最后根据远缘链球菌ftsK基因序列设计引物,增加酶切位点,克隆出ftsK内部一段基因,体外构建ftsK基因敲除自杀载体pVA9812,利用同源重组构建了ftsK基因失活菌株,并观察其生长的情况。为进一步研究细胞分裂蛋白相关基因ftsk在远缘链球菌分裂过程中的作用作了有益的尝试。本研究分为以下三个部分: 一、远缘链球菌ftsK基因克隆、蛋白表达和抗体制备 登陆Genbank,根据远缘链球菌ftsK基因全长设计一对引物,利用PCR技术,扩增出其全长片段(约2.1kb),将扩增的片段插入pGEM-T Easy克隆载体,转化大肠杆菌DH5α,挑选阳性克隆,提取质粒DNA,通过限制性酶切进行鉴定并进行核苷酸序列测定。结果表明:克隆的远缘链
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