胃癌是全球范围内致死率位居第二的恶性肿瘤,5年生存率不足25%。由于胃癌早期患者无明显症状,且大部分病人都不主动做胃镜检查,诊断时已步入中晚期。因此,寻找可靠的生物标志物作为早期诊断依据成为胃癌研究领域的热点。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)是一类不编码蛋白或只是编码较短的多肽、长度大于200个核苷酸的RNA分子。lnc RNA在表观遗传学水平上调控基因表达,与肿瘤的发生、发展密切相关。研究发现在外周血中有稳定的循环lnc RNA存在,表明血浆或血清lnc RNA可能会成为一种非侵入性的肿瘤早期诊断、基因治疗及预后评估的肿瘤新型标志物。缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible fator-1,HIF-1)是一类在缺氧时位于人和哺乳动物体内最广泛的内源转录因子。反义缺氧诱导因子(antisense hypoxia inducible facter,a HIF)是HIF-1α的反义转录物,且能够识别互补序列。研究发现,a HIF在肝癌、肾癌、宫颈癌和乳腺癌等恶性肿瘤中发挥原癌基因的功能。在细胞周期激酶抑制因子4(INK4)基因座中反义非编码RNA(antisense non-coding RNA in the INK4 locus,ANRIL)定位于9q21染色体上,通过表观遗传调节细胞的生长、增殖、衰老与凋亡。近年来研究发现,ANRIL参与并调控多种恶性肿瘤的发生、发展,如肺癌、黑色素瘤、肝癌和白血病等。目的:探讨lnc RNA a HIF和ANRIL在胃癌组织、胃粘膜上皮癌变细胞及胃癌患者血浆中的表达情况及其联系,结合临床病理参数分析并讨论其临床价值。方法:1、检测组织中a HIF和ANRIL的表达采集33例胃癌患者的胃癌组织及配对的癌旁组织,应用q RT-PCR检测lnc RNA a HIF和ANRIL的表达水平。2、建立细胞模型,检测细胞中a HIF和ANRIL的表达用与人类胃癌相关的化学致癌剂N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导人胃粘膜上皮永生化细胞系GES-1癌变,得到恶性转化后的MC细胞。光学显微镜下观察比较GES-1、MC细胞的形态变化,用Western blot实验检测E-钙黏蛋白(E-cad)、波形蛋白(Vimentin)及磷酸化蛋白(P-STAT3)的表达水平,同时用荧光定量PCR检测lnc RNA a HIF和ANRIL在GES-1、MC细胞中的表达情况。3、检测外周血中a HIF和ANRIL的表达采集胃癌患者的血浆51例和性别、年龄与之对应的健康者血浆51例,采用q RT-PCR检测血浆中lnc RNA a HIF和ANRIL的表达水平,比较分析a HIF、ANRIL在胃癌患者血浆中的表达与在胃癌组织中的相关性。统计并分析血浆中a HIF、ANRIL的表达与胃癌患者临床病理参数之间的关系。结果:1、q RT-PCR显示lnc RNA a HIF和ANRIL在胃癌组织中的表达水平明显高于配对的癌旁组织(P均<0.01)。2、光学显微镜下显示,正常胃粘膜上皮细胞GES-1形态呈梭形,排列有序,呈单层生长;经化学诱导剂MNNG处理后的MC细胞形态发生显著改变,细胞接触紧密,细胞变大,伸出触角,呈不规则形、多触角形、长梭形及多核型。Western blot显示MC细胞中胃癌相关蛋白E-cad低表达、Vimentin及P-STAT3均高表达。与GES-1细胞相比,lnc RNA a HIF和ANRIL在MC细胞中表达明显上调(a HIF:P<0.01;ANRIL:P<0.05)。3、胃癌患者血浆中lnc RNA a HIF和ANRIL的表达水平较健康者明显升高(P均<0.01),与胃癌组织中的表达水平呈正相关(a HIF:r=0.721,P<0.01;ANRIL:r=0.719,P<0.01)。lnc RNA a HIF和ANRIL在胃癌患者外周血中的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、浸润深度以及分化程度之间无明显相关性(P>0.05),而与淋巴结转移有一定的相关性(P<0.05)。结论:在胃癌组织、胃粘膜上皮癌变细胞及胃癌患者血浆中,lnc RNA a HIF和ANRIL均呈高表达,且其在胃癌患者血浆中的表达水平与在胃癌组织中呈正相关;a HIF和ANRIL在胃癌患者外周血中的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、浸润深度以及分化程度无关,与淋巴结转移相关。通过检测血浆lnc RNA a HIF和ANRIL表达情况可对临床诊断胃癌提供新的线索。