miR-7对裸鼠人胃癌种植瘤增殖的影响及其靶向作用EGFR基因的研究

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目的:研究miR-7对裸鼠人胃癌种植瘤增殖的影响及其靶向作用于EGFR基因的机制。方法:培养人胃癌细胞MGC-803细胞系。使用BABL/c裸鼠建立动物模型。随机分为3组,实验组(瘤内转染miR-7mimics组),阴性对照组(瘤内转染无意义序列组),空白对照组。Lipofectamine2000瞬转增加肿瘤组织中miR-7表达,观察肿瘤生长情况;运用双荧光素酶报告基因检测验证EGFR是否为miR-7的靶基因;采用RT-PCR检测三组裸鼠人胃癌种植瘤的EGFR的mRNA转录水平,采用免疫组织化学方法检测EGFR蛋白表达情况。结果:体内转染micro-7mimics组肿瘤生长较阴性对照组和空白对照组肿瘤生长明显缓慢。RT-PCR检测各组种植瘤中miR-7表达水平,相对于空白组、阴性对照组,miR-7mimics组种植瘤的miR-7表达水平明显上升。miR-7转染组较转染阴性对照组、转染试剂空白对照组的EGFR的mRNA及蛋白表达水平均降低。结论:1.通过促进胃癌种植瘤miR-7的表达可以抑制肿瘤生长,说明miR-7的靶基因中存在与肿瘤增殖有关的基因。2.miR-7能够下调EGFR基因mRNA及蛋白质的表达从而抑制胃癌细胞生长。
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