【摘 要】
：
本课题系"构建产辅酶Q大肠杆菌基因工程菌"项目的基础工作.大肠杆菌辅酶Q生物合成途径中,ubiC基因编码的分枝酸裂解酶以及ubiA基因编码的4-羟苯甲酸八异戊二烯转移酶分别催化
论文部分内容阅读
本课题系"构建产辅酶Q<,10>大肠杆菌基因工程菌"项目的基础工作.大肠杆菌辅酶Q生物合成途径中,ubiC基因编码的分枝酸裂解酶以及ubiA基因编码的4-羟苯甲酸八异戊二烯转移酶分别催化第一、二步反应,而后者是整个合成途径的限速酶.本课题将PCR扩增得到的ubiA和ubiCA基因分别克隆于不同启动子的下游,对其表达量进行了分析,并通过HPLC检测分析了重组菌中辅酶Q<,8>产量的变化,结果表明ubiA和ubiCA在lacZ启动子介导下的表达使辅酶Q<,8>的产量分别为对照的1.2和1.7倍;为进一步提高4-羟苯甲酸八聚异戊二烯转移酶活性,本课题拟对ubiA基因进行改组实验,初步进行了改组实验的条件摸索,并在体外构建了Km插入灭活ubiA基因的重组片段Km-△ubiA.ispB和ddsA基因分别是大肠杆菌和弱氧化葡糖杆菌中辅酶Q侧链长度控制基因,其对应的编码产物分别决定了大肠杆菌合成辅酶Q<,8>而弱氧化葡糖杆菌则为辅酶Q<,10>.为实现大肠杆菌产辅酶Q<,10>,需将ddsA基因原位取代大肠杆菌染色体上的ispB基因,为此构建了用于基因原位替换的重组片段Km-△ispB2和Km-△ispB5,由于携带的ddsA基因表达盒活性不强,致使同源重组实验未得到期望的同源交换子;据此构建了ddsA基因的不同表达质粒.
其他文献
随着橡胶工业的飞速发展,橡胶在各行各业有着广泛的应用,人们对橡胶的了解的探究也越来越深入。橡胶作为高分子聚合物可能在有机溶剂中溶解,溶解过程要先是溶剂分子渗入橡胶内部,橡胶的体积膨胀,这被称之为“溶胀”。因此探究橡胶在有机溶剂的溶胀过程及溶胀前后的橡胶性能有着重要的意义。在现今国内外研究溶胀的实验中,大部分还是采用原始的称重法及测定体积法,虽然较为新型的溶胀测试方法有很多,但这些测试手段归其原理还
生物磁学是一门新兴的科学,主要研究磁场对生物的特性以及生命活动规律之间的影响。经过多年的研究与发展,生物磁学在各个领域都已有广泛的应用,如:医学、农学、生物工程等领
配电网系统是大规模复杂系统,用电设备繁多,其工作状态与地理信息有密切联系,导致台帐管理压力较大,日常运行维护工作繁冗。然而,配电网作为直接沟通供电企业和用电企业的桥梁,其运行效率高低和维护工作的好坏,直接影响供电企业的社会形象和经济效益。GIS平台能将反映当前电网状态的数据最大程度地集中一体。将WebGIS技术引入电力系统配电网运行与维护中,通过Internet网络平台,在网络上发布配电网设备信息
IEC 61850标准的发布为数字化变电站的建设提供了参考和指导,本论文介绍了IEC 61850标准的内容,并且详细阐述了变电站自动化系统的IEC 61850建模过程,IEC 61850定义了逻辑节点并由逻辑节点组成逻辑设备实现相应功能,采用通用信息片来描述逻辑节点之间的信息交换。为了满足不同报文的性能要求,定义了抽象通信服务接口描述功能或设备面向通信的外在表现,并通过特殊通信服务映射来实现到不同
本文用布朗动力学方法研究了钾离子通道与蝎毒的相互作用和相互识别的过程，阐明了它们之间的作用机制。基于Kv1.3钾离子通道的同源模建模型，我们综合采用布朗动力学方法和
从复合生态系统的角度来看，陆地生态系统是支撑与维持地球的生命支持系统，维持生命物质的生物地化循环与水文循环，维持生物物种与遗传多样性，净化环境，维持大气化学的平衡与稳定。
偶联G蛋白的信号跨膜转导通路是细胞内外信息交换的重要途径,它主要由受体、G蛋白和效应器组成.在偶联G蛋白的信号跨膜转导通路中,G蛋白起着"信号介导者"的核心作用.G蛋白存
广域后备保护系统针对大电网,利用先进的通信与信息技术,将全局信息引入,可以解决传统后备保护动作时间长,整定配合复杂,受运行方式影响大等缺点,实现对电网整体的优化与控制。广域后备保护系统地位重要,功能全面,信息处理量大。如果所有功能的实现和信息的处理都依靠广域决策中心完成,会带来硬件处理能力不足,通信拥堵,配置复杂等问题。为了解决上述问题,本文提出了以变电站为基本单元的广域后备保护系统构成体系。广域
该文从种群、群落和景观不同的层次研究了马尾松毛虫的时空动态规律和暴发机制.研究结果表明马尾松毛虫发生的时间动态为减幅波动,其周期性不显著,而具有一定的复杂性,这种类