白鲜皮的化学成分及其活性研究

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白鲜皮为芸香科白鲜属植物白鲜(Dictamnus dasycarppus Turcz)的根皮,是一种常用中药,为历代本草及中国药典收藏。李时珍称其为诸黄风痹要药,具有祛风,燥湿,清热,解毒等功效,用于治疗风热疮毒,疥癣,皮肤痒疹,风湿痹痛,黄疸等病。现代药理试验表明白鲜皮具有抗真菌、抗癌、止血、杀虫等多种活性。我们课题组的前期研究发现:白鲜皮水提物能选择性的抑制PCI所致接触性皮炎及绵羊红细胞所致足跖反应的效应相,但对诱导相无影响,其对二甲苯及鸡蛋清所致的炎症亦有显著的抑制作用,并能抑制体液免疫反应,进一步于效应相给药能显著改善迟发型变态反应性肝损伤。为探明其具有免疫抑制作用的活性成分,我们对白鲜皮的化学成分进行了系统研究,并对其中一些化合物的活性进行了探讨。 从白鲜皮60%乙醇提取物的二氯甲烷部位分到16个化合物,通过理化方法和波谱技术(1H-NMR,13C-NMR,MS)鉴定了其中的13个化合物:梣酮(Fraxinellone,CD01),白鲜碱(dictamnine,CD02),黄柏酮(obacunone,CD03),柠檬苦素(limonin,CD04),β-谷甾醇(β-sitosterol,CD05),Dasycarine(CD06),合帕洛平(haplopine,CD07),8-methoxyflindersine(CD08),7 α-乙酰基黄柏酮(7 α-acetylobacunol,CD09),7 α-乙酰基柠檬苦素(7 α-limonyl acetate,CD10),对—羟基苯甲酸(p—Hydroxybenzoic acid,CD12),1,2,3-三羟基—5—甲氧基苯(1,2,3-Benzenetriol,5—methoxy—,CD13),胡萝卜甙(daucosterol,CD15)。其中化合物CD08,CD10,CD12,CD13,CD15均为首次从白鲜属植物中分离得到。 化合物CD03(黄柏酮)和CD04(柠檬苦素)都是柠檬苦素类化合物(limonoids),CD01(梣酮)是柠檬苦素类化合物的天然降解产物,它们均具有内酯环和β-取代 呋喃环结构,且在白鲜皮中的含量较高。为了考查柠檬苦素类化合物的构效关系,我们对化合物CD01,CD03和CD04进行了细胞毒试验,Con A所致小鼠脾细胞的增殖试验以及Con A诱导的小鼠免疫性肝损伤试验。结果显示,三个化合物对于正常脾细胞的存活和Con A所致的脾细胞增殖均无显著影响;腹腔注射三个化合物均能显著改善Con A所致的肝损伤并抑制肝组织中部分炎症因子的表达和产生。这表明,柠檬苦素类化合物中的呋喃环和内酯环可能在此活性方面很重要。药理试验结果表明,柠檬苦素(CD04)是白鲜皮中具有选择性免疫抑制活性的主要成分之一。为获得柠檬苦素标准品,我们利用HPLC法对分离得到的柠檬苦素样品进行了纯度检测。由于它的溶解性较差,我们采用了先用二氯甲烷溶解,再用甲醇稀释的方法来提高样品的浓度。但我们发现用二氯甲烷溶解的柠檬苦素在HPLC图谱中出现了三个峰。为了探索除柠檬苦素以外的其他两个成分,我们利用HPLC、LC—MS法及Austin Modell(AM1)计算对此进行了深入的研究。 结果表明:柠檬苦素与二氯甲烷发生相互作用,并通过其羰基上的氧原子与二氯甲烷上的氢原子形成的氢键产生了两种溶剂化物。
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