广谱高效生物农药木霉菌的诱变及其拮抗和生防作用的研究

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木霉(Trichoderma)常分离于根际、土壤、叶围等环境,生存范围广、适应性强、对植物病原菌具有广谱的拮抗作用,而且还能产生多种酶类分解土壤中的动植物残体,产生使植物能够吸收利用的有机物。 本研究从山东省多种生态区取得不同土样、利用微生物分离方法,从852份采集样品中,分离到野生木霉菌株255株,利用常规形态鉴定法和凝胶电泳分类的聚类分析鉴定,隶属木霉属的8个种,它们分别是绿色木霉(T. viride)、哈茨木霉(T. harziamum)、钩状木霉(T. hamatum)、黄绿木霉(T. aureoviride)、桔绿木霉(T. citrinoviride)、长枝木霉(T. longibrachiarum)、康氏木霉(T. koningii)、拟康氏木霉(T. pseudokoning)。 进一步与植物土传病原真菌进行拮抗作用实验,选出了拮抗作用较好的菌株T32,分析了木霉的拮抗作用机理。对部分植物病菌拮抗作用的方式主要有重寄生作用、营养竞争作用和空间位点竞争作用等几种。其中对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)(小麦纹枯病)的作用是重寄生作用:而对大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)(棉花黄萎病)、棉蔫萎镰孢霉(Fusarium vasinfectum)(棉花枯萎病)、玉米黑粉菌(Ustilago maydis)(玉米黑粉病)主要是营养竞争作用:对瓜蔫萎座镰孢霉(F. bulbigenum)(西瓜枯萎病)、茄腐皮镰孢霉(F. solani)(大豆根腐病)等是空间位点竞争作用。 利用核辐射等诱变技术,60Co-γ射线最佳辐射剂量为0.8kGy-1kGy,紫外线照射为5-7分钟,结合突变菌株对部分杀菌剂化学农药耐药性及对6种植物土传病菌的拮抗作用大小、生长速度快慢、产孢量多少等指标,选出高拮抗性、高产孢量、生长速度快的突变菌株T1010。 对突变菌株T1010进行发酵条件进行实验,结果表明其生长所需碳氮比为24:1,葡萄糖为最佳碳源,甘氨酸为最佳氮源,磷、钾、硫是生长必须元素。培养菌丝最适温度为30℃,pH值6,高温培养3天后转入低温20℃培养产孢。大量培养时麦麸作培养基既方便又省钱,大量生产木霉制剂0.5吨,制剂木霉孢子含量达
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