基于拉曼光谱的生物组织成像研究

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拉曼光谱属于非弹性散射,通常发生在可见光及近红外波段。拉曼光谱技术具有无损快速准确的优点,通过特定的振动模式,拉曼光谱可以识别不同的物质,并且可以高特异性地观察分子变化。由于这些优点,拉曼光谱逐渐应用于生物化学领域,并取得了可观的成果和进展。本文分两部分,第一部分使用无标记拉曼共聚焦成像研究镉污染后肝脏组织的变化。首先收集正常肝组织和镉中毒肝组织样品并冷冻切片,对所有肝组织选取100?m?100?m区域做拉曼光谱面扫描采集。研究两大类组织中重要大分子在区域中的分布变化规律,并且通过对区域平均拉曼光谱的比较来量化描述肝脏组织的生化成分变化。与对照组相比,镉中毒小鼠肝脏在748cm-1、1128cm-1和1585cm-1代表蛋白质的条带强度明显降低,在1082cm-1处代表胶原蛋白的峰值明显高于对照组,说明镉中毒肝组织纤维化程度加重。在确认结果后,我们选择了一个30?m?15?m肝细胞区域进行高分辨率拉曼成像。结果表明,在肝细胞的特定部位脂质和蛋白质大量增加。肝脏组织的共聚焦拉曼成像为更好地了解原发性肝脏组织的疾病诱导的生化表型变化提供了一个独特的工具。我们的研究为体外研究人肝脏中镉元素积累和毒性提供了有价值的参考。第二部分研究了食用百合冷藏过程中主要营养成分的变化规律。百合营养价值丰富,含有丰富的蛋白质、碳水化合物、脂质、矿物质元素等基本营养物质。百合中含有的百合多糖对人体具有极高的药用价值,可以提高人体免疫力。另外,百合中含有的生物碱和多酚类化合物能够起到预防癌症的效果。百合种植几乎分布在全国各地,本文中我们首先对比了几种不同产地百合的拉曼光谱。分析表明,拉曼谱可以给出百合中的多糖类、蛋白质类以及类胡萝卜素等物质信息。我们也可以看到不同种类百合的各类物质含量存在一定的差异。其次,我们以新鲜出土的兰州百合为对象,使用拉曼光谱技术研究了百合鳞片随着冷藏时间增长各营养组分的变化。我们发现如果冷藏时间较短,百合光谱内一些峰位强度会增长,淀粉强度降低。但当储存时间较长时,百合中各组分对应光谱强度总体会降低,这与相关文献报道结果相符合。此外,研究还发现同一片鳞片内层和外层的拉曼光谱有着较大的差异,外层在1605cm-1,1640cm-1代表氨基酸类峰位有较高强度,内层则无这些峰位。
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